CB2 receptorok megoszlása gerincvelő hátsó szarvában

Dátum
2011-05-06T11:52:25Z
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

Az endocannabinoid rendszer működése és aktivitása a szervezet legtöbb szövetében és szervében igazolt, szerepet játszik számos fiziológiai és patológiai folyamatban. A CB2 elsősorban az immunrendszer sejtjeiben, valamint a hemopoetikus rendszerben expresszálódik. Sikerült kimutatni a központi idegrendszerben, agyi és gerincvelői szinten egyaránt, viszont pontos megoszlását és működésének mechanizmusát nem ismerjük. A CB2 receptor gerincvelői szinten betöltött szerepének és működésének megismerése érdekében célul tűztük ki a CB2 receptor megoszlásának vizsgálatát a gerincvelő hátsó szarvában. A kereskedelmi forgalomban kapható CB2 antitestek közül ki akartuk választani azt, amelyik specifikusan képes kimutatni a CB2 receptorokat az általunk használt kísérleti állatok, patkányok és egerek gerincvelőjének hátsó szarvában. A specifikusnak talált antitesttel vizsgálni akartuk a CB2 receptor megoszlását a lumbalis gerincvelői szürkeállomány hátsó szarvában. A rendelkezésünkre álló antitestekkel DAB és fluoreszcens alapú immunhisztokémiai reakciót végeztünk a CB2 receptor kimutatására vad típusú (Black 6), illetve CB2 K.O. egerek lumbalis gerincvelői szakaszaiból származó metszeteken. Az immunhisztokémiai reakciókkal párhuzamosan Western blot vizsgálatokat is végeztünk annak érdekében, hogy kiválaszthassuk a legspecifikusabb antitestet további vizsgálataink céljára. Az immunhisztokémiai és a Western blot vizsgálatok alapján az Abcam anti-CB2 AB 45942 antitest tűnt a legmegfelelőbbnek a teszteltek közül. További kísérleteinket az Abcam anti-CB2 AB 45942 antitestjével végeztük. A kiválasztott Abcam ab45942 antitesttel a továbbiakban patkány gerincvelő lumbalis szegmentumának metszetein fluoreszcens alapú immunhisztokémiai kettős jelöléses reakciókkal mikroglia (CD11b) és astrocita (GFAP) markerekkel kívántuk meghatározni azt, hogy a CB2 receptor gliasejteken, vagy neuronokon lokalizálódik-e a gerincvelő hátsó szarvában. A CB2 jelölés pont, illetve foltszerű festődést mutat. A mikroglia sejtek esetén a CB2 receptor főként a sejttestben helyezkedik el, megjelenése a nyúlványokon nem jellemző. Az astrocita sejteket tekintve a CB2 receptort a nyúlványokon figyelhetünk meg. A co-lokalizáció mértéke ebben az esetben szemmel láthatóan kisebb, mint a mikroglia sejtek esetén. Eredményeink az irodalmi adatokkal egybehangzóan azt mutatják, hogy a CB2 receptor a gerincvelő hátsó szarvában mikroglia és astrocita sejteken egyaránt megtalálható. A CB2 receptor gerincvelő hátsó szarvában való megoszlásának pontosabb meghatározásához további vizsgálatokra van szükség. Elektronmikroszkópos, illetve további fluoreszcens alapú immunhisztokémiai vizsgálatok és a reakciókról készült konfokális felvételek kvantitatív elemzésének eredményei eddigi eredményeinkkel együttesen nézve pontosabb képet kaphatnánk a CB2 receptor megoszlásáról a gerincvelő hátsó szarvában.

Leírás
Kulcsszavak
CB2 receptor
Forrás