Redoxi és sav-bázis kölcsönhatások fémion-peptid rendszerekben

Dátum
2011-05-09T07:32:06Z
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

Diplomamunkám során több, hisztidin és szerin tartalmú peptidek réz(II)-ionok jelenlétében bekövetkező oxidációját tanulmányoztam HPLC-vel, továbbá az oxidáció során létrejövő fragmensek elválasztásához és LC-MS-sel történő analíziséhez szükséges módszert próbáltam kidolgozni. Ezen peptidek közül a GASAG pentapeptid Cu(II)- és Ni(II)-kompexeinek oldategyensúlyi vizsgálatát is elvégeztem. A hisztidin és szerin tartalmú peptidek fémionokkal való kölcsönhatása jelentős szerepet játszik a neurodegeneratív betegségek kialakulásában, ezért az ilyen irányú kutatások rendkívül fontosak. A pH-potenciometriás, CD-spektroszkópiás és UV-VIS spektroszkópiás mérésekkel a GASAG pentapeptid komplexképző tulajdonságait tanulmányoztam. A méréseket 1:1 és 1:2 fém:ligandum arányoknál végeztük el. Deprotonálódási és komplex stabilitási állandóit meghatározva és a Gly5 állandóival összehasonlítva megállapítottam, hogy a harmadik helyen lévő Ser önmagában nem befolyásolja a pentapeptid komplexkémiai viselkedését. A GASAG peptid és tripeptidek (GGH, GMG) Cu(II)/H2O2 rendszerrel oxidáltam és az oxidációs termékeket HPLC-vel vizsgáltam. A kromatogramok felvétele során kiderült, hogy ezen peptidek az adott HPLC-s módszerrel nem vizsgálhatók, mivel a tripeptidek túl rövidek, a pentapeptid pedig nem tartalmaz elég poláris csoportot. Egy másik pentapeptid, amely három His-t tartalmaz, a HAHVH oxidációjának vizsgálatát is elvégeztem HPLC-vel. A kísérletek során tanulmányoztam a kolonna, áramlási sebesség és oldószerösszetétel hatását az elválasztásra. A leghatékonyabb elválasztást C8-as kolonnán, 0,1% TFA és 3% MeCN eluenssel, 1 ml/perc áramlási sebességgel, 4 órás reakcióidővel és négyszeres mennyiségű H2O2-al értük el. Azonban az LC-MS mérésekhez alkalmazható körülményekhez kellett igazodnunk, ami alapján úgy módosítottuk a módszert, hogy C18-as kolonnán, 0,1% hangyasav és 1% MeCN eluenssel, 1 ml/perc áramlási sebességgel futtattuk a reakcióelegyet. Bár ez a módszer alkalmazható LC-MS-hez is, az analízis nem vezetett eredményre. 0,01M NH4OAc-t alkalmazva 3% MeCN eluenssel a retenciós időt sikerült jelentősen növelni, ami reményeink szerint az LC-MS készülékkel történő vizsgálatnál is eredményre vezet.

Leírás
Kulcsszavak
hisztidin, oxidáció
Forrás