A rosszindulatú daganatok a halálozási lista élén járnak, ezen belül is az emlőrák a nők körében az egyik leggyakoribb rákfajta. A daganatok hatékony kezelése még napjainkban is nagy problémát jelent a klinikumban. A kevés mellékhatással rendelkező gyógyszerek kifejlesztésének lehetősége az élőlényekből történő anyagok izolálása. Egy ilyen módon előállított anyag az elisidepsin, amelynek teljesen egyedi hatásmechanizmusa van az eddig vizsgált kemoterápiás szerekkel összehasonlítva. Fő célkitűzésünk az volt, hogy a gyógyszer hatását vizsgáljuk az ErbB fehérjék és lipid tutajok eloszlására és szerkezetére, valamint különböző ErbB receptorokat kifejező sejtvonalak elisidepsin érzékenységét hasonlítsuk össze. Az emlőkarcinómák 20-30%-a fokozott ErbB2 expressziót mutat, ami rossz prognózissal társul. A trastuzumab (Herceptin) volt az első humanizált ErbB2 ellenes monoklonális antitest, amit az előrehaladt állapotú emlődaganatok kezelésére használtak. Azonban a trastuzumab-rezisztencia egy éven belül kialakult és mivel ennek egyik lehetséges oka az ErbB2 trastuzumab kötő epitópjának hialuronsav általi maszkírozása, vizsgálni kívántuk a hialuronsav molekula szerepét az ErbB2 maszkírozásában humán tumormintákon. A fehérje-fehérje kölcsönhatás vizsgálata elősegíti a sejtek magasabb szerveződési szintű komplexeinek, szerkezet-függő funkcióinak és ezáltal a jelátviteli folyamatok szabályozásának megértését. Munkám során én is gyakran alkalmaztam a fluoreszcencia rezonancia energiatranszfer (FRET) módszert, amelyet metszeteken csak korlátozottan lehet használni. Nemrég írták le a proximitás ligációs vizsgálatot (PLA), melyet kiváló jel-zaj aránya miatt nehéz kísérleti körülmények között is ajánlanak, azonban még nem elemezték a módszert kvantitatív szempontból. Ez ösztönzött minket arra, hogy összehasonlítást végezzünk a FRET és a PLA mérési módszerek kvantitatív teljesítményét illetően.

Despite an ever deeper understanding of the molecular background of malignancy and promising new therapeutic approaches cancer remains the leading cause of death in developed countries. Breast cancer is the second most common after lung cancer. In addition to rational drug development the natural habitat also provides a valuable source for drug discovery and development. Elisidepsin is a marine-derived anti-tumor agent with unique mechanism of action. We investigated the effect of the drug on the distribution of ErbB proteins and lipid rafts and compared the elisidepsin sensitivity of cell lines overexpressing ErbB receptors. In breast cancer ErbB2 is particularly important, since it is overexpressed in 20-30% of breast cancers. Trastuzumab (Herceptin®) was the first monoclonal antibody against ErbB2 developed to treat solid human tumors based on genomic research. The development of trastuzumab resistance is still unpredictable because its mechanism is unknown although a multitude of factors have been implicated. Masking of the trastuzumab binding epitope of ErbB2 by hyaluronan also leads to trastuzumab resistance. Such correlations have not been confirmed in human tumor samples. The characterization of protein associations and their alterations induced by drug molecules not only reveals the intricacies of signal transduction networks but also promises to be a profitable tool for the development of efficient therapeutical approaches. In my PhD work I used both fluorescence resonance energy transfer (FRET) and proximity ligation assay (PLA) methods. The application of FRET is not widespread for histological specimens because the high background would introduce large errors into the calculations. PLA is an applicable technique for detection of protein complexes under harsh experimental conditions, but it has not been evaluated in a systematic way, prompting us to compare its performance to that of FRET quantitatively.