Az amygdala magok kapcsolatrendszereinek feltérképezéséhez használható transzgenikus egerek jellemzése

Dátum
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

Az amygdala mandula alakú páros képlet, ami az emlősök agyának mediális temporális lebenyében helyezkedik el, a hippokampusztól rostrálisan. Részt vesznek többek közt a memória, a tanulás szabályozásában, a figyelem fenntartásában és a szenzoros információk érzelmi feldolgozásában. Munkánk során célul tűztük ki, hogy karakterizáljunk három, a bazolaterális amygdala komplex (BLA) területén sejtpopulációk szelektív vizsgálatára kiválasztott egértörzset. A Cre rekombinázt kifejező idegsejtek arányainak meghatározása után arra fókuszáltunk, hogy az összes serkentő, azaz CamKII+ sejt közül hány százalékuk fejezi ki ezt az enzimet. Végül arra kerestük a választ, hogy ezen állattörzsekben mennyire hatékonyan tudjuk a Cre rekombináz aktivitását adeno-asszociált vírus vektor (AAV) segítségével monitorozni. Ezeket a vizsgálatokat fluoreszcens immuncitokémiai festésekkel végeztük el, amelyekhez konfokális mikroszkóppal készítettünk felvételeket, végül Neurolucida 10.3 szoftver segítségével számszerűsítettük adatainkat. Eredményeink a következők: az általunk vizsgált három egértörzs (Arhgef6/Cre, Carpt/Cre és Rbp4/Cre) és egy riporter egérvonal kereszteződéséből származó utódok BLA-jában a ZsGreen1 zöld fluoreszcens fehérjét expresszáló sejtek nagy százalékban CamKII+, vagyis serkentő fősejtek, és csak kis százalékban CamKII- -ak, vagyis feltehetően gátló interneuronok. Az Arhgef6/Cre és a Carpt/Cre törzs esetében ezen sejtek a BA területén, míg az Rbp4/Cre törzs esetében a laterális (LA) és a bazomediális (BMA) területén találhatók. Az Arhgef6/Cre törzs esetében a CamKII+ serkentő fősejtek nagy része a Cre-t kifejező zöld sejt, míg a Carpt/Cre törzs esetében a CamKII+ sejteknek csak kis része ZsGreen1 fluoreszcens fehérjét kifejező sejt. Az Rbp4/Cre törzs esetében az LA-ban a CamKII+ sejteknek valamivel kevesebb része zöld sejt, míg a BMA-ban a CamKII+ sejtek nagy százaléka Cre promótert kifejező zöld sejt. Az AAV vektorral injektált állatok esetében az Arhgef6/Cre törzs BA területén található neuron markert expresszáló (NeuN+) sejtek nagy része zöld fluoreszcens fehérjét (GFP) is kifejez, míg a Carpt/Cre törzsnél a BA-ban nagyobb százalékban találunk GFP- sejteket. Az Rbp4/Cre törzsnél az LA-ban a NeuN+ sejtek döntő többsége GFP-, míg a BMA-ban nagy részük GFP+. Ezen AAV vírusinjektált állatokban kapott eredmények mindhárom törzs esetében összevethetőek azzal, ahogy a riporter egerekben a zöld fluoreszcens proteint expresszáló sejtek aránya alakul a CamKII+ sejtek között. A számadatok azt tükrözik, hogy az AAV vírus segítségével ugyanolyan hatékonyan tudjuk a Cre rekombinázt expresszáló sejteket vizualizálni ezekben az egerekben, mint ahogy a ZsGreen1 fluoreszcens proteinnel jelölt specifikus riporter gén jelöli meg a sejteket.

Leírás
Kulcsszavak
amygdala, transzgén, agy, egér, serkentő fősejtek, interneuronok
Forrás