A time-lapse videó mikroszkópia szemészeti klinikumból származó mintákon való felhasználhatóságát két szinten vizsgáltuk: egyedi sejteken az OCM-1 sejtek rendellenes osztódásainak karakterizálásával, sejtpopulációs szinten a limbális sejtek monolayer karc regenerációs modelljének felhasználásával bizonyítottuk. Az uveális melanóma (OCM-1) sejtek multipoláris osztódások, vagyis trivisiok dinamikai és morfológiai jellegzetességei: A digitális képanalízissel kapott kvantitatív adatok alapján a trivisiok átlagosan 40 perccel hosszabb ideig tartottak. Az anya, és leánysejtjeinek térfogat-aránya az átlagos 43% hoz képest 22% volt. A multipoláris sejtosztódások gyakorisága az OCM-1 sejtek esetében viszonylag magas értéket adott, 0,27% volt. A folyamat kezdetét jellegzetes morfológiai elváltozás a tripolarizációként leírt folyamat jellemzi, ami a sejtmaganyag, illetve az egész sejt háromirányú szétválásával írható le. A corneoscleralis limbális gyűrűből izolált HuLi (Humán Limbális) sejteket a szöveti eredetük, morfológiai sajátosságaik és genetikai markeriek alapján őssejtnek tekintjük. Izolálásuk óta hosszútávon fenntartjuk, és folytonos sejtvonalként tartjuk számon. A cornea felszíni hámsérülés regenerációját modellezheti a limbális sejtek monolayer karcmodellje, amit time-lapse mikroszkópiával követünk végig és az így nyert képszekvenciák digitális analízisével a regeneráció celluláris szintű dinamikáját vizsgáltuk. Megkülönböztettük a folyamat négy fázisát, és bevezettünk egy, a karc eredeti területétől független kvantitatív jellemzőt, ami karcszéli sejtek a felsértett területre irányuló migrációját számszerűsíti. A time-lapse mikroszkópos citotoxikológiai megfigyeléseket a vizsgált anyagok genotoxikus hatásainak tanulmányozásával egészítettük ki. A HuLi monolayer regenerációja során a celluláris növekedés a vizsgált antibiotikumok jelenlétében fordított arányoságot mutatott a növekvő koncentrációkkal. A többfalú szén nanocsövek hatására a regeneráció a koncentráció függvényében lelassult a sejtek gátolt, zavart migrációja miatt, melyet a regenerációs görbén késleltetett növekedéssel, a fázisok összemosódásával és a motilitásban növekvő fluktuációkkal jellemezhetünk. Az ezüst és arany nanorészecske kezelés a regeneráció hasonló mértékű elhúzódását és a sejtek osztódás előtti gátlását okozta. Az apoptotikus sejtek hiányából mindkét nanorészecske esetében arra következtettünk, hogy a gátló hatásaik visszafordíthatók.

The applicability of time-lapse video microscopy in ophthalmic clinic specimens was presented at two levels, on single cells by characterizing the abnormal divisions of OCM-1 cells; at the cell population level was demonstrated using a monolayer scratch regeneration model of limbal cells. Multipolar divisions ie, trivisions, of uveal melanoma (OCM-1) cells, dynamic and morphological characteristics: Based on the quantitative data obtained by digital image analysis trivisions lasted on average 40 minutes longer than the divisions. The volume ratio of mother and daughter cells was 22% compared to an average of 43%. The frequency of multipolar cell division was relatively high for OCM-1 cells, it was 0.27%. The onset of the process is identified by a characteristic morphological change, a process described as tripolarization, which a three-way separation of the nucleus and the whole cell. HuLi (Human Limbal) cells isolated from the corneoscleral limbal ring, are considered as stem cells based on their tissue origin, morphological features, and genetic markers. The cells have been maintained from isolation in a long term and considered as a continuous cell line (HuLi). The regeneration of the corneal surface can be modeled by the monolayer scratch model of limbal cells, which is followed by time-lapse microscopy, and by digital image analysis of the resulting image sequences, the cellular dynamics of the regeneration was examined. We distinguished four phases of the process and introduced a quantitative feature that is independent of the original area of the scratch and that quantifies the migration of cells from scratched edges to the affected area. The time-lapse microscopic observations of cytotoxicology were supplemented by studying the genotoxic effects of the test substances. In the regeneration of HuLi monolayer, cellular growth in the presence of antibiotics (chloramphenicol and rifampicin) showed an inversely proportional relationship to the increasing concentrations used. Multiwalled carbon nanotubes have slowed the concentration-dependent regeneration of the cells due to inhibited, disturbed migration of the cells, which is characterized by delayed growth in the regeneration curve, phase mixing, and increased fluctuations in motility. Silver and gold nanoparticle treatment resulted in a similar delay in regeneration, and caused the inhibition of the chromatin condensation process of cells prior to proliferation. In the absence of apoptotic cells, it is concluded that the inhibitory effects observed in the presence of particles could be reversible for both nanoparticles