A protein kináz C izoenzimek szerepe szisztémás lupus erythematosusban és a MonoMac-6 sejtek folyamatainak szabályozásában

Absztrakt

Kísérleteink során a protein kináz C (PKC) izoenzimek expressziós mintázatát és funkcióját tanulmányoztuk szisztémás lupus erythematosusos (SLE) betegek T-sejtjeiben és monocitáiban, valamint a MonoMac-6 sejtek esetében. Igazoltuk, hogy az SLE-s betegek limfocitáiban a klasszikus cPKCβ, novel nPKCδ, ε, η és atípusos aPKCζ expressziója, míg az SLE-s betegek monocitáiban az nPKCδ, ε és aPKCζ szintje csökkent, ugyanakkor a többi izoforma kifejeződése nem változott. Kimutattuk, hogy mind az in vivo, mind az in vitro kortikoszteroid kezelés (különböző mértékben) csaknem az összes (de nem minden) PKC izoforma expresszióját normalizálta. Bebizonyosodott, hogy ezen változások kizárólag az SLE-s betegek esetében mutathatóak ki, azaz Sjögren-szindrómás, Kevert Kötöszöveti Betegségben (MCTD) szenvedők sejtjeiben a PKC izoformák kifejeződése nem változott a kontrollhoz viszonyítva. A MonoMac-6 sejteket vizsgálva igazoltuk, hogy két dominánsan expresszálódó izoforma, a cPKCβ és a nPKCδ serkenti a sejtek AA termelését és proliferációját. Bebizonyosodott továbbá, hogy az AA felszabadulás növelésében a kalcium independens foszfolipáz A2 (iPLA2) és a diacilglicerol (DAG) lipáz játszik szerepet. Kimutattuk ugyanakkor, hogy a cPKCα kisebb mértékben expresszálódik a sejtekben, és antagonisztikus, gátló funkciót tölt be az AA termelés és proliferáció szabályozásában. Összességében megállapítottuk, hogy a különböző PKC izoenzimek sejt-, szövet- és betegségspecifikus, valamint kortikoszteroid kezeléstől függő expressziós mintázattal rendelkeznek, továbbá, hogy specifikus és egymással ellentétes szereppel bírnak a MonoMac-6 sejtek proliferációjának és AA termelésének szabályozásában.

We have studied the expressions of various protein kinase C (PKC) isoenzymes in T-cells and monocytes from patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and in MonoMac-6 cells. We found that the levels of cPKCβ, nPKCδ, η, ε, θ and aPKCζ in T-cells, whereas the expressions of nPKCδ, ε and aPKCζ (but not the expressions of other PKC isoforms) in monocytes of SLE patients were significantly decreased. In vivo corticosteroid application, as well as in vitro steroid treatment of monocytes, elevated the expressions of most isoforms close to normal values; however, the decreased levels of nPKCθ and aPKCζ were not affected by steroid application. These alterations were characteristic to SLE because we could not detect any changes in the PKC levels in mononuclear cells of primary Sjögren's syndrome and mixed connective tissue disease patients. Experiments with MonoMac-6 cells revealed that the two dominantly expressed isoenzymes, i.e. cPKCβ and nPKCδ promote AA production and cellular proliferation. In addition, we were able to show that the calcium-independent iPLA2 as well as diacylglycerol lipase (but not the cytosolic cPLA2) function as "down-stream" targets of cPKCβ and nPKCδ. We have also found that, among the other existing PKC isoforms, cPKCα plays a minor inhibitory role whereas nPKCε and aPKCζ apparently do not regulate these cellular processes. In conclusion in this thesis we provide the first evidence that (corticosteroid dependent) impaired PKC isoenzyme pattern exist in the T-cells and monocytes of SLE patients and furthermore, PKC isoforms play pivotal, specific, and (at least partly) antagonistic roles in the regulation of AA production and cellular proliferation of human monocytoid MonoMac-6 cells.

Leírás
Kulcsszavak
protein kináz C, szisztémás lupus erythematotus, monocita, limfocita, arachidonsav, proliferáció, MonoMac-6 sejtvonal
Forrás