Magreceptorok ligandkötési affinitásának vizsgálata FRET szenzorral

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorVámosi, György
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Biofizikai és Sejtbiológiai Intézethu_HU
dc.contributor.authorKovács, Dávid
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentTóth, Réka
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Orvosi Képalkotó Intézethu_HU
dc.date.accessioned2017-06-07T09:51:03Z
dc.date.available2017-06-07T09:51:03Z
dc.date.created2017
dc.description.abstractBevezetés: A magreceptorok olyan transzkripciós faktorok, amelyek ligandvezérelt módon képesek transzkripció szabályozására. Inaktív, ligand nélküli állapotukban korepresszor fehérjék gátolják a transzkripció inicializálását. A retinsav receptorok központi szerepet játszanak az endokrin szignalizációban, az embrió vagy akár a felnőttkori fejlődésben és amyloid sejtek differenciálódásában. Diplomamunkámban az emberi retinsav alfa receptor (RAR) és retinoid x receptor (RXR) magreceptorok ligandkötési affinitását vizsgáltam a ligandkötő doménjük (LBD) konformációváltozása révén. Olyan DNS konstruktokat (plazmidokat) kellett létrehoznom, amelyekben a receptorok ligandkötő doménje fluoreszcens festékek szekvenciái között van kódolva. Ezen plazmidokat eukarióta sejtekbe juttatva, azok képesek a következő fehérjéket kifejezni (N->C terminális irányban): EGFP-RAR-LBD-mCherry illetve EGFP-RXR-LBD-mCherry. Az az elképzelés, miszerint, ha a ligandkötő doménekhez bekötődik a ligand, az LBD konformációváltozása révén a két fluoreszcens proteint közelebb viszi egymáshoz, így a Förster rezonancia energia transzfer hatásfok változása alapján következtethetünk, hogy milyen mértékben kötődik a ligand. Eredmények: Az áramlási citometria mérések eredményei alapján kiszámítottuk az átlagos FRET hatásfok értékeket az egyes mintákban. A különböző ligand koncentrációkkal kezelt sejtekben nem volt egyenes arányosság a ligand koncentráció és a FRET hatásfok között. A plazmid konstruktokban túl hosszú a linker szakasz az LBD-k és az mCherry fehérje között. Az optimális FRET hatásfok értékekhez szükséges a konstruktok újratervezése.hu_HU
dc.description.courseorvosi laboratóriumi és képalkotó diagnosztikai analitikushu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.coursespecOrvosi kutatólaboratóriumi analitikahu_HU
dc.description.degreeBSc/BAhu_HU
dc.format.extent37hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/241552
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectmagreceptorhu_HU
dc.subjectRXRhu_HU
dc.subjectRARhu_HU
dc.subjectligandkötéshu_HU
dc.subjectaffinitáshu_HU
dc.subjectFREThu_HU
dc.subjectszenzorhu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudományhu_HU
dc.titleMagreceptorok ligandkötési affinitásának vizsgálata FRET szenzorralhu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)