Fehérjék bontására alkalmas enzimreaktorok fejlesztése mikrofluidikai csipekben

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorGáspár, Attila
dc.contributor.authorKecskeméti, Ádám
dc.contributor.departmentKémiai tudományok doktori iskolahu
dc.contributor.submitterdepDE--Természettudományi és Technológiai Kar -- Szervetlen és Analitikai Kémiai Tanszék
dc.date.accessioned2018-06-18T18:23:13Z
dc.date.available2018-06-18T18:23:13Z
dc.date.created2018hu_HU
dc.date.defended2018-09
dc.description.abstractKutatómunkám során kétféle, fehérjék bontására alkalmas mikrofluidikai, immobilizált tripszint tartalmazó enzimreaktort fejlesztettem ki. A reaktorok kialakításához PDMS felületen történő spontán adszorpciót, ill. szilika részecskékre történő kovalens immobilizálást használtam. SPR és CZE mérésekkel igazoltam, hogy a tripszin erősen adszorbeálódik a PDMS felszínén és aktivitását néhány óráig megőrzi. Mindkét reaktor emésztésének reprodukálhatóságát és hatékonyságát különböző tiszta fehérjeminták, továbbá humán szérum és könnyminták emésztésével vizsgáltam. Az emésztéshez szükséges időt így sikerült nagyságrendekkel lecsökkenteni, az adszorbeált tripszint tartalmazó reaktor esetén ~1 percre, míg a kovalensen rögzített tripszint tartalmazó reaktor esetén ~10 s-re. A kovalensen rögzített tripszines reaktor jó stabilitással rendelkezik (2 hónap). Igazoltam, hogy a töltet részecskék 1 mg-ján 10-13 µg tripszin kötődik meg az immobilizálási reakcióban.hu_HU
dc.description.abstractTwo different microfluidic immobilized enzymatic reactor capable of rapid protein digestion was developed during my PhD research. Spontaneous protein adsorption on PDMS and covalent bonding to silica particles were applied for the immobilization of trypsin. SPR and CZE measurements proved that trypsin strongly adsorbs onto the surface of PDMS and retains activity for ~2 h. The reproducibility and efficiency of the digestion was tested by digesting several protein standards, human serum and tear samples. Thus, digestion time was decreased from 16 h to ~1 min with the reactor containing adsorbed trypsin and to ~10 s with the reactor containing covalently bonded trypsin. Covalently bonded trypsin retained its activity for at least 2 months. The surfacial concentration of trypsin on the silica particles was determined, which was 10-13 µg trypsin / mg particle.hu_HU
dc.format.extent112hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/255164
dc.language.isohuhu_HU
dc.language.isoenhu_HU
dc.subjectmikrofluidikahu_HU
dc.subjecttripszinhu_HU
dc.subjectfehérjebontáshu_HU
dc.subjectmicrofluidicshu_HU
dc.subjecttrypsinhu_HU
dc.subjectprotein digestionhu_HU
dc.subjectimmobilizáláshu_HU
dc.subjectimmobilizationhu_HU
dc.subject.disciplineKémiai tudományokhu
dc.subject.sciencefieldTermészettudományokhu
dc.titleFehérjék bontására alkalmas enzimreaktorok fejlesztése mikrofluidikai csipekbenhu_HU
dc.title.translatedDevelopment of protein digesting enzymatic reactors in microfluidic chipshu_HU
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 3 (Összesen 3)
Nincs kép
Név:
ertekezes_06_FINAL_titkositott.pdf
Méret:
3.03 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Doktori értekezés
Letöltés
Nincs kép
Név:
tezisek_ka_magyar_titkositott.pdf
Méret:
863.21 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Doktori értekezés tézisei - magyar
Letöltés
Nincs kép
Név:
tezisek_ka_angol_titkositott.pdf
Méret:
804.32 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Doktori értekezés tézisei - angol
Letöltés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
1.93 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Kémiai Tudományok Doktori Iskola