Az angiogenezis markerek és a miRNS-ek kapcsolatának tanulmányozása vesetumoros betegek mintáin, valamint az angiogenezis útvonalakkal kapcsolatos terápiás célpontok keresése a humán CAKI-2 és az A-498 vesedaganat sejtvonalakon végzett in vitro vizsgálatok segítségével

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorSzabó, Zsuzsanna
dc.contributor.authorKirály, József
dc.contributor.authorvariantKirály, József
dc.contributor.departmentGyógyszertudományok doktori iskolahu
dc.contributor.submitterdepGyógyszerésztudományi Kar::Biofarmácia Tanszék
dc.date.accessioned2025-02-27T05:51:16Z
dc.date.available2025-02-27T05:51:16Z
dc.date.defended2025-03-28
dc.date.issued2024
dc.description.abstractMunkánk során a vesetumorok kialakulásában szerepet játszó egyes epigenetikai faktorok (miRNS-ek) expressziós mintázatát vizsgálatuk a Debreceni Egyetem Urológiai Klinikáján vesetumorral diagnosztizált betegek mintáin. A hsa-miR-15b, a hsa-miR-99b valamint a hsa-miR-181a expressziós szintjeit vizsgálva nemcsak azt figyeltük meg, hogy a tumoros szövetminták szignifikánsan alacsonyabb szinten expresszálják az említett miRNS-eket, hanem azt is, hogy ezen miRNS-ek expressziójának mértéke összefügg a tumoros minták patológiai grádusával. Számos miRNS kapcsolódik az RCC tumorképződésében részt vevő molekuláris jelátviteli útvonalak szabályozásához, mely miRNS-ek alapot szolgáltathatnak az RCC terápiájához, mivel képesek kiegyensúlyozni a pro- és antiangiogén folyamatokat, és képesek szabályozni az angiogenezis egyes lépéseit. A hsa-miR-15b, a hsa-miR-99b és a hsa-miR-181a angiogenezisben potenciálisan szerepet vállaló célmolekuláit in silico adatbáziselemzéssel azonosítottuk. A célpontok expressziós szintjeit qRT-PCR-al vizsgálva megfigyeltük az ANG, a VEGF és a HIF-1α emelkedését a tumoros mintákban, továbbá a VEGF receptorai közül a VEGFR-1 és a VEGFR-3 is növekedett expressziót mutatott. Megállapítottuk továbbá, hogy a VEGF és a HIF-1α erősebb expressziót mutat a daganatos szövetekben a patológiai grádus előrehaladásával. A mátrix metalloproteinázok és inhibitorai közül az MMP-9/MMP-2 és TIMP-1/TIMP-2 ko-expresszióját figyeltük meg, melyek szerepet játszhatnak a tumorok vaszkularizálásában. A metasztatikus vesedaganatok terápiáját érintően vizsgáltuk egy természetes hatóanyag, a shikonin sejtproliferációra és apoptózisra kifejtett hatását humán vesedaganat sejtvonalakon. A shikonin a már terápiában alkalmazott sunitinibhez hasonlóan tirozin-kináz inhibitorként fejti ki hatását, és mint az a vizsgálatainkból kiderült, a sunitinibbel ellentétben jóval alacsonyabb koncentrációban is hatásos. Az apoptózisra kifejtett hatását a PI3K/AKT és MAPK útvonalak szabályozásán keresztül fejti ki, az extracelluláris mátrix fehérjék (CXCR4, MMP-2/-9, E-kadherin) expressziójának csökkentése révén pedig gátolja a sejtek invázióját. Megfigyelésünk szerint a shikonin kezelés eredményesen csökkenti egyes multidrog transzporterek expresszióját, ezáltal jelentős szerepe lehet a kialakult gyógyszer-rezisztencia ellen. Remélhetőleg eredményeink a jövőben jelentősen hozzájárulnak az vesedaganatok korai diagnózisának felállításához, a szükséges biomarkerek vagy akár angiogén markerek időben történő azonosításához, továbbá az in vitro kísérleteink alapján eredményes hatóanyagnak bizonyult shikonin fontos szerepet kaphat a jövőben elsősorban kombinált-, de akár monoterápiás alkalmazásként is.
dc.description.abstractIn the course of our work, we investigated the expression pattern of certain epigenetic factors (miRNAs) that might play a role in the development of kidney tumors in the samples of patients diagnosed with kidney tumors at the Urology Clinic of the University of Debrecen. Examining the expression levels of hsa-miR-15b, hsa-miR-99b and hsa-miR-181a, we not only observed that the tumorous tissue samples express the mentioned miRNAs at a significantly lower level, but we also could see that the level of expression is related to the pathological grade of the tumorous samples. Several miRNAs are related to the regulation of molecular signaling pathways involved in RCC tumorigenesis, which miRNAs can provide a basis for RCC therapy, as they can balance pro- and antiangiogenic processes and regulate individual steps of angiogenesis. Targets of hsa-miR-15b, hsa-miR-99b and hsa-miR-181a potentially involved in angiogenesis were identified by in silico database analysis. Examining the expression levels of the targets by qRT-PCR, we observed an increase in the expression of ANG, VEGF and HIF-1α in the tumorous samples, and among the VEGF receptors, VEGFR-1 and VEGFR-3 also showed increased expression. We also found that VEGF and HIF-1α show stronger expression in tumorous tissues as the pathological grade progresses. Among matrix metalloproteinases and their inhibitors, we observed the co-expression of MMP-9/MMP-2 and TIMP-1/TIMP-2, which may play a role in tumor vascularization. Regarding the therapy of metastatic kidney tumors, we investigated the effect of a natural active ingredient, shikonin, on cell proliferation and apoptosis in human kidney tumor cell lines. Similarly to sunitinib, which is already used in therapy, shikonin exerts its effect as a tyrosine kinase inhibitor, and as it turned out from our studies, unlike sunitinib, it is also effective at a much lower concentration. It exerts its effect on apoptosis through the regulation of the PI3K/AKT and MAPK pathways, and by reducing the expression of specific extracellular matrix proteins (CXCR4, MMP-2/-9, E-cadherin) that may inhibit cell invasion. We have observed that shikonin treatment effectively reduces the expression of some multidrug transporters, thus it can play a significant role against existing drug resistance. It is hoped that our results will contribute to the identification of biomarkers necessary for the early diagnosis of kidney tumors, and shikonin, which has proven to be an effective active ingredient based on our in vitro experiments, may play an important role as a therapeutic application in the future (whether used as a monotherapeutic or combination therapy agent).
dc.format.extent112
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/387630
dc.language.isohu
dc.language.isoen
dc.subjectvesesejtes karcinóma
dc.subjectrenal cell carcinoma
dc.subjectshikonin
dc.subjectmiRNS
dc.subjectA-498
dc.subjectmiRNA
dc.subjectCAKI-2
dc.subject.disciplineGyógyszertudományokhu
dc.subject.sciencefieldOrvostudományokhu
dc.titleAz angiogenezis markerek és a miRNS-ek kapcsolatának tanulmányozása vesetumoros betegek mintáin, valamint az angiogenezis útvonalakkal kapcsolatos terápiás célpontok keresése a humán CAKI-2 és az A-498 vesedaganat sejtvonalakon végzett in vitro vizsgálatok segítségével
dc.title.translatedStudy of the relationship between angiogenesis markers and miRNAs in human samples of patients with renal carcinoma, and search for therapeutic targets related to angiogenesis pathways by using in vitro studies with human CAKI-2 and A-498 kidney cancer cell lines
dc.typePhD, doktori értekezéshu
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 4 (Összesen 4)
Nincs kép
Név:
Értekezés.pdf
Méret:
6.23 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nincs kép
Név:
Tézisfüzet (magyar).pdf
Méret:
1.24 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nincs kép
Név:
Tézisfüzet (angol).pdf
Méret:
1.06 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nincs kép
Név:
Meghívó.pdf
Méret:
258.07 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
1.93 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Gyógyszerészeti Tudományok Doktori Iskola