Fluoreszcencia élettartam és teljes belső visszaverődés mikroszkóp integrált számítógépes vezérlése

Dátum
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

A molekulák közötti kölcsönhatásoknak, és ezen belül a sejtmembránban elhelyezkedő receptorok interakciói miatt létrejövő módosult jelátviteli folyamatoknak egyre nagyobb orvosi jelentőséget tulajdonítanak. A fluoreszcencia rezonancia energiatranszfer (FRET) egy olyan, jelenség, melyből molekuláris kölcsönhatásokra lehet következtetni. Egyik lehetséges mérőmódszere a fluoreszcencia élettartam mikroszkópia (FLIM). Mivel a vizsgált receptorok számos esetben nem csak a sejtmembránban, de a citoplazmában is megtalálhatók, a membránból érkező jelek szelektív mérésére a teljes belső visszaverődésen alapuló (TIRF) mikroszkópia lehet megoldás. A két módszer kombinációja jelentős előnyöket hozhat a sejtbiológiai kutatásokban. Munkám célja az volt, hogy a FLIM-TIRF kombinált mikroszkóp 3 különböző gyártótól (Lambert, Märzhauser, Olympus) származó 5 részegységének (LIFA frekvencia-domén élettartam mérő, Tango motorizált tárgyasztal, IX81 mikroszkóp váz, ZDC2 fókuszstabilizátor, és cell^Tirf négycsatornás TIRF csatoló) 5 különböző kezelőfelülete helyett egységes, átlátható, és összehangolt működést biztosító, felhasználóbarát grafikus vezérlőfelületet készítsek. Munkámat C++/Qt fejlesztő környezetben végeztem, figyelmet fordítva a nyílt forráskódú és ingyenes technológiák használatára. Nagy jelentőséget tulajdonítottunk a részegységek kezelése mellett azok védelmére; a program folyamatosan kommunikálva az eszközökkel figyelmeztet az elkerülendő műveletsorokra is, hosszú távon megteremtve a lehetőségét a felhasználóbarát és mikroszkópkímélő használatnak (pl.: a motoros tárgyasztal kalibráló mozgása nem engedélyezett, amíg az objektív mintavizsgáló pozícióban van; a mikrocsatornás képerősítő csak alacsony intenzitású áteső fényű megvilágításnál működik). Alaposan tanulmányozva az eszközöket és a mérési folyamatot, sikerült olyan integrált számítógépes vezérlő szoftvert kialakítani, amely nem csak megkönnyíti a mérési folyamatot, de képes feladat- specifikus jelentést is generálni róla. Programunk segítségével egységes szoftverkörnyezetben használhatóak a mikroszkóp részegységei, felhasználók számára átláthatóan, támogató leírásokkal, védve az eszközöket a nem megfelelő használatból származó sérülésektől.

Leírás
Kulcsszavak
FRET, TIRF, mikroszkópvezérlés, FLIM, rendszerintegrálás
Forrás