Rizs protein foszfatáz 2 A B'' (PP2A B”) alegységének termeltetése baktériumban

dc.contributor.advisorFarkas, Ilona
dc.contributor.authorNótár, Balázs
dc.contributor.departmentDE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2010-05-07T10:19:31Z
dc.date.available2010-05-07T10:19:31Z
dc.date.created2010-05-06
dc.date.issued2010-05-07T10:19:31Z
dc.description.abstractA protein foszfatáz 2A (PP2A) fontos szerepet játszik az állatok sejtciklusának regulációjában, többek között a retinoblasztóma fehérjék foszforilációs állapotát is szabályozza. A PP2A és a retinoblasztóma-fehérjék homológjai növényekben is megtalálhatók, de funkciójuk sokkal kevésbé ismert, mint az állatokban. A PP2A változó B regulátor alegységei meghatározzák a foszfatáz sejten belüli lokalizációját és szubsztrátspecificitását. A Szegedi Biológiai Központban végzett kísérlet szerint a lucerna PP2A B” alegysége élesztő kéthibrid-rendszerben kölcsönhatásba lép az OsRBR1 retinoblasztóma-homológ rizs fehérjével, így a B” alegységet tartalmazó növényi PP2A holoenzimnek in vivo is szerepe lehet az OsRBR1 defoszforilációjában. Ennek tanulmányozása érdekében a rizs PP2A B” alegységet hexahisztidin-fúziós fehérjeként expresszáltuk E. coli baktériumban, majd Ni2+-agaróz kromatográfiával homogén formában tisztítottuk. A rekombináns fehérje ellen poliklonális ellenanyagot termeltettünk nyúlban. Az antiszérumot affinitás-kromatográfiával tisztítottuk. Az ellenanyagot dot blottal és Western blottal vizsgáltuk. Eredményeink szerint a PP2A B” antitest nemcsak a rekombináns His6-PP2A B” fehérjét ismeri fel, hanem – a Western blottal azonosított protein molekulatömege alapján) a rizs szuszpenziós sejtkivonatban és a levélkivonatban levő PP2A B” fehérjét is. Ennek alapján a továbbiakban felhasználhatjuk az ellenanyagot többek között a PP2A-val kölcsönható fehérjék azonosítására immunprecipitációs kísérletekben.hu_HU
dc.description.correctorgj
dc.description.courseBiológiahu_HU
dc.description.degreeBschu_HU
dc.format.extent26hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/95777
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectPP2A B"hu_HU
dc.subjectfehérje tisztításhu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudomány::Orvosi vegytanhu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományok::Immunológiahu_HU
dc.titleRizs protein foszfatáz 2 A B'' (PP2A B”) alegységének termeltetése baktériumbanhu_HU
Fájlok