Rizs protein foszfatáz 2 A B'' (PP2A B”) alegységének termeltetése baktériumban
dc.contributor.advisor | Farkas, Ilona | |
dc.contributor.author | Nótár, Balázs | |
dc.contributor.department | DE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai Intézet | hu_HU |
dc.date.accessioned | 2010-05-07T10:19:31Z | |
dc.date.available | 2010-05-07T10:19:31Z | |
dc.date.created | 2010-05-06 | |
dc.date.issued | 2010-05-07T10:19:31Z | |
dc.description.abstract | A protein foszfatáz 2A (PP2A) fontos szerepet játszik az állatok sejtciklusának regulációjában, többek között a retinoblasztóma fehérjék foszforilációs állapotát is szabályozza. A PP2A és a retinoblasztóma-fehérjék homológjai növényekben is megtalálhatók, de funkciójuk sokkal kevésbé ismert, mint az állatokban. A PP2A változó B regulátor alegységei meghatározzák a foszfatáz sejten belüli lokalizációját és szubsztrátspecificitását. A Szegedi Biológiai Központban végzett kísérlet szerint a lucerna PP2A B” alegysége élesztő kéthibrid-rendszerben kölcsönhatásba lép az OsRBR1 retinoblasztóma-homológ rizs fehérjével, így a B” alegységet tartalmazó növényi PP2A holoenzimnek in vivo is szerepe lehet az OsRBR1 defoszforilációjában. Ennek tanulmányozása érdekében a rizs PP2A B” alegységet hexahisztidin-fúziós fehérjeként expresszáltuk E. coli baktériumban, majd Ni2+-agaróz kromatográfiával homogén formában tisztítottuk. A rekombináns fehérje ellen poliklonális ellenanyagot termeltettünk nyúlban. Az antiszérumot affinitás-kromatográfiával tisztítottuk. Az ellenanyagot dot blottal és Western blottal vizsgáltuk. Eredményeink szerint a PP2A B” antitest nemcsak a rekombináns His6-PP2A B” fehérjét ismeri fel, hanem – a Western blottal azonosított protein molekulatömege alapján) a rizs szuszpenziós sejtkivonatban és a levélkivonatban levő PP2A B” fehérjét is. Ennek alapján a továbbiakban felhasználhatjuk az ellenanyagot többek között a PP2A-val kölcsönható fehérjék azonosítására immunprecipitációs kísérletekben. | hu_HU |
dc.description.corrector | gj | |
dc.description.course | Biológia | hu_HU |
dc.description.degree | Bsc | hu_HU |
dc.format.extent | 26 | hu_HU |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/2437/95777 | |
dc.language.iso | hu | hu_HU |
dc.subject | PP2A B" | hu_HU |
dc.subject | fehérje tisztítás | hu_HU |
dc.subject.dspace | DEENK Témalista::Orvostudomány::Orvosi vegytan | hu_HU |
dc.subject.dspace | DEENK Témalista::Biológiai tudományok::Immunológia | hu_HU |
dc.title | Rizs protein foszfatáz 2 A B'' (PP2A B”) alegységének termeltetése baktériumban | hu_HU |