Új farmakológiai ágensek hatásának vizsgálata különféle keratinocita gyulladásos modellekben
Új farmakológiai ágensek hatásának vizsgálata különféle keratinocita gyulladásos modellekben
Dátum
Szerzők
Lendvai, Alexandra
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt
Jelen dolgozat keretén belül a Cannabis növényben megtalálható fő, nem pszichotróp fitokannabinoid, a kannabidiol (CBD), illetve a CBD különböző pozíciókban történő fluorinálásával előállított fluorinált szemi-szintetikus CBD származékok (F-CBD-k) anti-inflammatorikus hatásainak vizsgálatát tűztük ki célul dermatitisz különböző változatait utánzó, in vitro gyulladásos modellrendszerekben.
A CBD és F-CBD származékok (HUF-101, HUF-103 és HU-559a) humán immortalizált keratinocita sejtvonalak (HaCaT, HPV-KER) életképességére gyakorolt hatását MTT-assay segítségével vizsgáltuk. Reverz transzkripciót követő kvantitatív, valós idejű polimeráz láncreakció (RT-qPCR) és „szendvics” enzim-kötött immunoszorbens assay (ELISA)-t alkalmazva detektáltuk a CBD és fluorinált-CBD kezelések hatására a pro-inflammatorikus citokinek expressziójában és felszabadulásában bekövetkező változásokat a munkacsoportunk által korábban optimalizált in vitro gyulladásos modellekben.
Eredményeink azt mutatják, hogy a CBD-vel és F-CBD-származékokkal történő kezelések nem csökkentették a HaCaT sejtek életképességét, míg a hosszú ideig tartó (72 óra), illetve nagy dózisú (3 μM-os és 10 μM-os) kezelések a HPV-KER sejtek életképességére ölő hatást fejtettek ki.
Génexpressziós vizsgálataink (RT-qPCR) során kapott eredményeink alapján mind a CBD, mind az F-CBD kezelések hatékonyan csökkentették a vizsgált pro-inflammatorikus citokinek és kemokinek (tumornekrózis (TNF)-α, interleukin (IL)-1α, IL-1β, IL-6, IL-8) mRNS szintű expresszióját, illetve fehérjeszintű vizsgálataink során az IL-6 és IL-8 gyulladásos citokinek és kemokinek szekrécióját, továbbá a vizsgált F-CBD származékok a növényi eredetű CBD-hez képest sokkal hatékonyabbnak bizonyultak.
Eredményeink alapján összességében elmondható, hogy gén- és fehérjeszintű vizsgálatainkban bizonyítottuk a CBD és F-CBD-k anti-inflammatorikus hatását HaCaT és HPV-KER humán epidermális keratinocitákban, dermatitiszes megbetegedéseket utánzó in vitro gyulladásos modellrendszerekben, továbbá az F-CBD-k hatékonyabb anti-inflammatorikus hatásúnak bizonyultak a vizsgált modellekben a növényi eredetű CBD-hez képest. További kísérletek függvényében feltételezhető, hogy az előállított fluorinált szemi-szintetikus CBD származékok a jövőben egy új anti-inflammatorikus terápiás szer kidolgozására adhatnak lehetőséget különböző dermatitiszes megbetegedések kezelésében.
Leírás
Kulcsszavak
fitokannabinoid, kannabidiol, fluorinált kannabidiol származékok, keratinocita, dermatitis