A XIII-as faktor vaszkuláris simaizomsejtek celluláris funkcióira és az α2-plazmin inhibitor heterogenitás fibrinolízisre kifejtett hatásának vizsgálata

Kissné Bogáti, Réka

A XIII-as faktor vaszkuláris simaizomsejtek celluláris funkcióira és az α2-plazmin inhibitor heterogenitás fibrinolízisre kifejtett hatásának vizsgálata

dc.contributor.advisor	Katona, Éva
dc.contributor.author	Kissné Bogáti, Réka
dc.contributor.authorvariant	Bogáti, Réka
dc.contributor.department	Laki Kálmán doktori iskola	hu
dc.contributor.submitterdep	Általános Orvostudományi Kar
dc.date.accessioned	2026-04-24T13:56:23Z
dc.date.available	2026-04-24T13:56:23Z
dc.date.defended	2026-05-11
dc.date.issued	2026
dc.description.abstract	A XIII-as véralvadási faktornak plazmatikus (pFXIII) és celluláris (cFXIII) formája ismert. Az aktivált forma (FXIIIa) a fibrinszálak keresztkötésével és az α2-plazmin inhibitor (α2PI) fibrinhez való kötésével biztosítja az alvadék stabilitását, ezen kívül szerepet játszik az angiogenezisben, sebgyógyulásban a terhesség megtartásában. A cFXIII a trombocyta, monocyta/makrofág sejteken kívül kimutatható, pl. az oszteoblasztokban is. A FXIIIa direkt hatását az atheroszklerotikus plakk kialakulásában szerepet játszó endotheliális sejtekre és fibroblasztokra már korábban kimutatták. A vaszkuláris simaizomsejtek (VSMC) a környezeti faktoroktól függően oszteoblaszt-szerű sejtekké képesek differenciálódni a plakkokban, ezért megvizsgáltuk, hogy a differenciáció társul-e FXIII-A expresszióval, ill. az extracelluláris FXIII-A milyen hatással van a VSMC-k funkcióira. Az oszteoblasztos transzformáció nem járt együtt cFXIII expresszióval. A nem aktivált FXIII-A nem volt hatással a VSMC-k különböző funkcióira. Az FXIIIa a VSMC-k proliferációját már a plazmakoncentrációnál alacsonyabb mennyiség esetén is fokozta. In vitro sebzáródási kísérletekben igazoltuk az FXIIIa proliferációra és migrációra gyakorolt kombinált hatását. Az FXIIIa fokozta a kollagén szintézisét és az extracelluláris mátrixba való beépülését. Az FXIIIa kezelés hatására a thrombospondin-1 (TSP-1) expresszió mértéke nem változott, azonban a médiumba leadott mennyiség csökkent, a képződő TSP-1 egy része a sejtekhez kötötten maradt. Az FXIIIa ezen hatásai szerepet játszhatnak az atheroszkerotikus plakkok patogenezisében. Az α2PI a plazmában heterogén szerkezetű, funkcionális következményekkel járó proteolitikus hasításokat szenved. A C-terminális végén hasított forma elveszíti a plazminogén-kötő helyét, ezért jóval lassabban képes a plazmint gátolni (NPB-α2PI), valamint az FXIIIa elsődlegesen a plazminogén-kötő, nem hasított formát (PB-α2PI) képes a fibrinnel keresztkötni. Az NPB-α2PI forma hatását a fibrinolízisre kevésbé vizsgálták. Jelen munkánkban vizsgáltuk az α2PI C-terminális izoformák mennyiségének összefüggését különböző plazma paraméterekkel, beépülésük mértékét a fibrinalvadékba, továbbá az alvadék szerkezetére és lízisére gyakorolt hatásukat. Az alvadékba beépült totál-α2PI 44,3±6,3%-nak, a PB-α2PI:NPB-α2PI arány 1,37-nak adódott, azaz jelentős mennyiségű NPB-α2PI is kötődik az alvadékhoz, nem kovalens módon. Az NPB-α2PI plazma szintje és az alvadékba beépült mennyisége szignifikáns pozitív összefüggést mutatott az alvadéklízis paraméterekkel (CLT50, MaxAbsz, AUC). In vitro kísérletekben az NPB forma is, bár kisebb mértékben, mint a PB-α2PI, de nyújtotta az alvadék lízisidőt. Az α2PI mindkét C-terminális variánsa hatással volt a fibrinalvadék szerkezetére, növelve a fibrinszálak vastagságát és csökkentve a pórusméretet. Eredményeink szerint az FXIIIa által keresztkötött PB-α2PI mellett a nem kovalensen az alvadékhoz kötődő NPB-α2PI is hatással van az alvadék szerkezetére és feloldására, ezért érdemes lenne tovább vizsgálni a heterogenitás hatását különböző patológiás körülmények között.
dc.description.abstract	Factor XIII exists in two forms: plasma (pFXIII) and cellular (cFXIII). The activated form (FXIIIa) ensures clot stability by cross-linking fibrin strands and binding α2-plasmin inhibitor (α2PI) to fibrin. It also plays a role in angiogenesis, wound healing, and maintenance of pregnancy. cFXIII can be detected in thrombocytes, monocytes/macrophages, and osteoblasts, among other cells. The direct effect of FXIII-A on endothelial cells and fibroblasts, which play a role in the formation of atherosclerotic plaques, has been demonstrated previously. Depending on environmental factors, vascular smooth muscle cells can differentiate into osteoblast-like cells in plaques, so we investigated whether this differentiation is associated with FXIII-A expression and whether extracellular FXIII-A has an effect on the functions of smooth muscle cells. Osteoblast transformation was not associated with cFXIII expression. Nonactivated FXIII-A had no effect on the various functions of smooth muscle cells. FXIIIa enhanced the proliferation of smooth muscle cells even at concentrations lower than plasma concentrations. In vitro wound closure experiments confirmed the combined effect of FXIIIa on proliferation and migration. FXIIIa enhanced collagen synthesis and incorporation into the extracellular matrix. FXIIIa treatment did not alter the expression level of thrombospondin-1 (TSP-1), but the amount released into the medium decreased, with part of the TSP-1 formed remaining bound to the cells. These effects of FXIIIa may play a role in the pathogenesis of atherosclerotic plaques. α2PI undergoes proteolytic cleavages in plasma, resulting in a heterogeneous structure with functional consequences. The form cleaved at the C-terminal end loses its plasminogen-binding site and is therefore much slower to inhibit plasmin (NPB-α2PI), while FXIIIa is primarily able to cross-link fibrin with the plasminogen-binding, uncleaved form (PB-α2PI). The effect of the NPB-α2PI form on fibrinolysis has been less studied. In our present work, we investigated the relationship between the amount of α2PI C-terminal isoforms and various plasma parameters, their incorporation into the fibrin clot, and their effect on the structure and lysis of the clot. The total α2PI incorporated into the clot was 44.3±6.3%, and the PB-α2PI:NPB-α2PI ratio was 1.37, indicating that a significant amount of NPB-α2PI also binds to the clot in a non-covalent manner. The plasma level of NPB-α2PI and the amount incorporated into the clot showed a significant correlation with clot lysis parameters (CLT50, MaxAbs, AUC). In in vitro experiments, the NPB form also prolonged clot lysis time, albeit to a lesser extent than PB-α2PI. Both C-terminal variants of α2PI affected the structure of fibrin clots, increasing the thickness of fibrin strands and reducing the pore size. According to our results, in addition to FXIIIa-crosslinked PB-α2PI, NPB-α2PI, which binds noncovalently to the clot, also affects the structure and dissolution of the clot; therefore, it would be worthwhile to further investigate the effect of heterogeneity in different pathological conditions.
dc.format.extent	82
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/2437/406464
dc.language.iso	hu
dc.language.iso	en
dc.subject	Faktor XIII, Vaszkuláris simaizomsejt, Sejtproliferáció, Sejtmigráció, Kollagén szekréció, Thrombospondin-1, Alpha2-plazmin inhibitor, Plazmin, Fibrinolízis, Fibrin alvadék szerkezet
dc.subject	Factor XIII, Vascular smooth muscle cell, Cell proliferation, Cell migration, Collagen secretion, Thrombospondin-1, Alpha2-plasmin inhibitor, Plasmin, Fibrinolysis, Fibrin clot structure
dc.subject.discipline	Elméleti orvostudományok
dc.subject.sciencefield	Orvostudományok	hu
dc.title	A XIII-as faktor vaszkuláris simaizomsejtek celluláris funkcióira és az α2-plazmin inhibitor heterogenitás fibrinolízisre kifejtett hatásának vizsgálata
dc.title.translated	Investigation of the effects of factor XIII on the cellular functions of vascular smooth muscle cells and of α2-plasmin inhibitor heterogeneity on fibrinolysis
dc.type	PhD, doktori értekezés	hu