A protein foszfatáz 2A (PP2A) szerepe tüdő artéria endothel sejtek citoszkeleton szerkezetének szabályozásában

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorCsortos, Csilla
dc.contributor.authorTar, Krisztina
dc.contributor.authorvariantVeréb Attila Lászlóné Tar, Krisztinahu
dc.contributor.departmentDE -- Orvos- és Egészségtudományi Centrum -- Általános Orvostudományi Kar -- Orvosi Vegytani Intézethu
dc.contributor.departmentElméleti orvostudományok doktori iskolahu
dc.date.accessioned2007-06-21T12:32:51Z
dc.date.available2007-06-21T12:32:51Z
dc.date.created2005
dc.date.defended2005-06-08
dc.descriptionAngol nyelvű összefoglalót tartalmazhu
dc.description.abstractAz erek belső falát boritó endothel sejtek számos fiziológiai folyamatban játszanak szerepet. Az érpermeabilitás megnövekedése különböző bioaktív ágensek hatására az endothel sejtek között kialakuló rések következménye. A sejtek közötti rések kialakulásában szerepe van az aktin-miozin kölcsönhatásnak, amely foszforilációval/defoszforilációval szabályozott folyamat. Az endothel sejtekben a miozin könnyű lánc kináz és protein foszfatáz 1 szerepe a miozin könnyű lánc foszforilációban illetve defoszforilációjában ismert. A másik alapvető Ser/Thr specifikus foszfatáz, a protein foszfatáz 2A (PP2A) gátlása jelentősen megnöveli a nokodazolnak-egy mikrotubulus (MT) inhibitor- hatását a sejtek közötti (intercelluláris) rések megnövekedésével, ami a PP2A részvételére utal endothel sejtek mikrotubulus –mediált barrier funkció szabályozásában és a citoszkeleton újrarendeződésében. Ahhoz, hogy a PP2A pontos szerepét tisztázhassuk az endotheliumban, a PP2A katalitikus (PP2Ac), regulátor (PP2Aa) és a regulátor alegység trunkált mutáns (PP2AaN) kódoló szekvenciáit emlős expressziós vektorokba szubklónoztuk és a konstruktokkal humán tüdő artéria endothel sejteket (HPAEC) transzfektáltunk és overexpresszáltuk a PP2A alegységeit. Immunofluoreszcens kísérletekkel kimutattuk, hogy a két alegység együttes expressziója az endothel sejtek kortikális aktinjának feldúsulásához és a stresszfilamentumok eltűnéséhez vezet. Akár a C alegység, akár a C és az A alegység együttes expressziója jelentősen mérsékli/megszünteti a nokodazol vagy trombin, mikrotubulust destabilizáló hatását, valamint átrendezi az aktin citoszkeleton szerkezetét, amiből a PP2A mikrotubulus rendszert védő szerepére és az aktin citoszkeletonon keresztül történő szabályozási folyamatokra következtettünk. A PP2A gátlása 5 nM okadánsavval megszünteti az overexpresszált alegységek EC citoszkeletonra kifejtett hatását, jelezve a PP2A aktivitásának szerepét endothel sejtek citoszkeleton szerkezetének szabályozásában. A PP2Ac ko-expressziója a trunkált mutánssal azt eredményezte, hogy a rekombináns PP2Ac-nek nem volt katalitikus aktivitása az aktinra/aktinkötő fehérjékre, amiből arra következtettünk, hogy a PP2Ac kötődése a PP2Aa+b-hez kritikus abban, hogy a PP2Ac a megfelelő szubsztrátokon kifejthesse hatását. Endothel sejtek fertőzése PP2A adenovírus konstruktokkal szintén jelentősen gyengíti a nokodazol vagy a trombin transzendothel elektromos rezisztenciára kifejtett hatását, jelezve a PP2A közvetlen szerepét az endothel sejtek mikrotubulus és F aktin- mediált permeabilitásváltozásában. Sejtfrakcionálási módszereinkkel kimutattuk, hogy a HSP27 és a tau, melyek endothel sejtekben a PP2A feltételezett szubsztrátjai a citoszkeletonban, jelentős mennyiségben jelen vannak a PP2A mellett a sejt tubulin gazdag frakciójában. Kísérleteinkben igazoltuk, hogy a PP2A gátlása növeli a tau foszforilációt, valamint a PP2A overexpressziója jelentősen csökkenti a nokodazol által kiváltott HSP27 és tau foszforilációt, ami előző eredményeinkkel összhangban szintén a PP2A citoszkeletont védő szerepére utal. Összességében ezek az adatok a PP2A közvetlen részvételére utalnak az endothel sejtek citoszkeleton szerkezetének és permeabilitásának szabályozásában.en
dc.description.bibliographyBibliogr.: p. 61-85hu
dc.description.degreeEgyetemi doktori (Ph.D.) értekezés ; Debreceni Egyetem, Orvos- és Egészségtudományi Centrum, Általános Orvostudományi Kar, Orvosi Vegytani Intézet, 2005hu
dc.description.degreePhDhu_HU
dc.format.extent85 pen
dc.format.extent209232 bytes
dc.format.extent148763 bytes
dc.format.extent2846731 bytes
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/2451
dc.languagehunhu
dc.languageenhu
dc.language.isohuen
dc.language.isoenen
dc.rightsA kéziratos egyetemi doktori (Ph.D.) értekezések, csak a szerzői jogok teljes tiszteletben tartásával használhatókhu
dc.subject.disciplineElméleti orvostudományokhu
dc.subject.sciencefieldOrvostudományokhu
dc.titleA protein foszfatáz 2A (PP2A) szerepe tüdő artéria endothel sejtek citoszkeleton szerkezetének szabályozásábanen
dc.title.subtitleegyetemi doktori (Ph.D.) értekezésen
dc.title.translatedThe Role of Protein Phosphatase 2A in the Regulation of Pulmonary Artery Endothelial Cell Cytoskeleton Structureen
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 3 (Összesen 3)
Nincs kép
Név:
Tar_Krisztina_ertekezes.pdf
Méret:
2.71 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nincs kép
Név:
Tar_Krisztina_tezis_angol.pdf
Méret:
145.28 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nincs kép
Név:
Tar_Krisztina_tezis_magyar.pdf
Méret:
204.33 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Gyűjtemények
Molekuláris Orvostudomány Doktori Iskola