A mitokondriális genomtopológia molekuláris vizsgálata

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorSzékvölgyi, Lóránt
dc.contributor.authorNagy, Katrin
dc.contributor.departmentDE--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2025-07-04T10:04:31Z
dc.date.available2025-07-04T10:04:31Z
dc.date.created2025-05-05
dc.description.abstractA diplomamunkám a mitokondriális genom topológiájának molekuláris vizsgálatával foglalkozik, különös tekintettel a TOP1MT (humán mitokondriális topoizomeráz I) fehérje vad típusának és R525W variánsának összehasonlító elemzésére. A TOP1MT kulcsszerepet tölt be a mitokondriális DNS (mtDNS) topológiájának szabályozásában, és egyedi nukleotid polimorfizmusai, mint az R525W variáns, potenciálisan befolyásolhatják a fehérje funkcióját és a mitokondriális folyamatokat. A kutatás során HCT 116 humán bélkarcinóma sejtvonalon végeztünk vizsgálatokat, amelyekben CRISPR/Cas9 módszerrel ki lett ütve a TOP1MT gén. A top1mt KO sejtekben tranziens transzfekcióval komplementáltuk a géndeléciót, sejtjeink vagy a TOP1MT vad típusát vagy az R525W variánst expresszálták tGFP-vel fúzionáltatva. A fehérjék diffúziós tulajdonságait és százalékos eloszlásukat fluoreszcencia korrelációs spektroszkópia (FCS) segítségével, míg mitokondriális lokalizációjukat konfokális lézerpásztázó mikroszkópiával (CLSM) és MitoTracker festéssel vizsgáltuk. Az eredmények statisztikai elemzése során összehasonlítottuk a vad típusú és a variáns (R525W) fehérje gyors és lassú komponenseinek diffúziós koefficienseit, valamint ezek százalékos eloszlását. Az FCS mérések három független kísérlet eredményei alapján nem mutattak szignifikáns különbséget a két fehérjeváltozat diffúziós koefficienseiben és százalékos eloszlásában. A kolokalizációs vizsgálatok igazolták, hogy mind a vad típusú, mind az R525W variáns TOP1MT fehérje a mitokondriumokban lokalizálódik. Eredményeink alapján az R525W variáns önmagában nem okoz jelentős eltérést a TOP1MT mobilitásában vagy lokalizációjában, azonban további vizsgálatok szükségesek a variáns funkcionális jelentőségének teljes körű feltárásához.
dc.description.courseBiológus MSc
dc.description.degreeMSc/MA
dc.format.extent58
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/395454
dc.language.isohu
dc.rights.infoHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.
dc.subjectFCS, mitokondriális topoizomeráz, TOP1MT, R525W variáns, CLSM
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományokhu_HU
dc.titleA mitokondriális genomtopológia molekuláris vizsgálata
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
A mitokondriális genomtopológia molekuláris vizsgálata.pdf
Méret:
9.98 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Megjelenítés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
2.35 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Biológiai és Ökológiai Intézet)