Nukleotid-kötő domén mutációk hatásának vizsgálata a P-glikoprotein katalitikus ciklusára

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorKormosné Goda, Katalin Klára
dc.contributor.advisorTarapcsák, Szabolcs
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.advisordeptBiofizikai és Sejtbiológiai Intézethu_HU
dc.contributor.authorÁgics, Beatrix
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentKiss, Andrea
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentdeptOrvosi Vegytani Intézethu_HU
dc.date.accessioned2018-06-22T09:15:45Z
dc.date.available2018-06-22T09:15:45Z
dc.date.created2018-06-20
dc.description.abstractA P-glikoprotein (Pgp) a sejtek plazmamembránjában kifejeződő aktív efflux transzporter, mely az ABC fehérjék családjába tartozik. Kifejeződése megvédi a sejteket számos a daganatos betegségek terápiájában alkalmazott citosztatikummal szemben, így részt vesz a daganatok kemoterápia rezisztenciájának, az ún. multidrog rezisztenciának a kialakításában. A Pgp két a szubsztrátok megkötéséért és transzportjáért felelős transzmembrán doménből (TMD) és két ATP-kötő doménből (NBD) épül fel. Az NBD-k együttesen két ATP megkötésére és hidrolízisére képesek, melynek során felszabaduló energia biztosítja a TMD-k konformáció változásait az intracelluláris tér felé nyitott, szubsztrát kötő és az extracelluláris tér felé nyitott, a szubsztrátok eltávolítására alkalmas konformáció között. Előbbi állapot felismerhető az UIC2 konformáció érzékeny kötődésű anti-Pgp antitest számára, míg az utóbbihoz nem képes kötődni. Munkacsoportunk egyik vagy mindkét NBD konzervált szekvenciáiban előidézett mutációk hatását vizsgálja a Pgp konformáció változásaira és katalitikus aktivitására azzal a céllal, hogy betekintést nyerjen a két NBD funkcionális kapcsolatába. A különböző mutáns Pgp variánsokat kifejező sejtek Pgp expresszióját tanulmányozva arra a következtetésre jutottam, hogy a vizsgált mutációk nem befolyásolják a transzporter plazmamembránba történő kijutását. További kísérleteimben az UIC2 antitestet felhasználva arra a kérdésre kerestem a választ, hogy az NBD mutációk befolyásolják-e a fehérje konformáció változásait. Kísérleteim alapján a féloldali és a kétoldali (E556Q/E1201Q) mutánsok az extracelluláris tér felé nyitott konformációt preferálják hasonlóan a vad típusú Pgp-hez, míg az (Y401A/Y1044A) és a (D555N/D1200N) mutánsok az intracelluláris tér felé nyitott konformációban detektálhatóak. Pgp szubsztrátok, valamint az ATP hidrolízist gátló vanadát adása vagy az ATP depléciója a féloldali mutánsokban konformáció változást idéz elő, míg a kétoldali mutánsok nem tudnak konformációt váltani. Eredményeim alátámasztják, hogy csak mindkét NBD együttes mutációja inaktiválja teljesen a Pgp-t.hu_HU
dc.description.coursemolekuláris biológiahu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.coursespecImmunológia, sejt- és mikrobiológiahu_HU
dc.description.degreeMSc/MAhu_HU
dc.format.extent43hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/255246
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectABC transzporterekhu_HU
dc.subjectp-glikoproteinhu_HU
dc.subjectmultidrog rezinsztanciahu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományokhu_HU
dc.titleNukleotid-kötő domén mutációk hatásának vizsgálata a P-glikoprotein katalitikus ciklusárahu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)