Multidrog rezisztenciát okozó P-glikoprotein kimutatása és funkciójának vizsgálata humán tumorból származó mintákban

Krasznai, Zoárd Tibor

Multidrog rezisztenciát okozó P-glikoprotein kimutatása és funkciójának vizsgálata humán tumorból származó mintákban

dc.contributor.advisor	Hernádi, Zoltán
dc.contributor.author	Krasznai, Zoárd Tibor
dc.contributor.department	Klinikai orvostudományok doktori iskola	hu
dc.contributor.submitterdep	DE--OEC--Általános Orvostudományi Kar -- Szülészeti és Nőgyógyászati Klinika
dc.date.accessioned	2007-11-27T15:52:56Z
dc.date.available	2007-11-27T15:52:56Z
dc.date.created	2007	en
dc.date.defended	2007-04-18
dc.date.issued	2007-11-27T15:52:56Z
dc.description.abstract	Munkánkban a multidrog rezisztenciáért felelős P-glikoprotein (Pgp) jelenlétét és működését vizsgáltuk fluoreszcenciás és izotópos technikákkal petefészekrákos sejteken. Klinikai vizsgálatokban először mutattuk ki, hogy a petefészek tumoros betegek asciteséből származó sejtekben, különböző mértékben, de jelen van a multidrog rezisztenciáért felelős egyik leggyakoribb fehérje a Pgp. A különböző citosztatikummal kezelt betegekből származó ascites mintákban változó mennyiségben (10-79 %) találtunk Pgp pozitív sejteket. A Pgp expressziót specifikus antitest jelöléssel, a Pgp működését pedig rodamin 123 szubsztráttal mutattuk ki fluoreszcenciás technikával. A Pgp funkciójának és expressziójának mértéke között szoros korrelációt találtunk. Kimutattuk, hogy az 18FDG glükóz metabolikus PET tracer akkumulációja nagyobb a Pgp pozitív petefészek tumoros sejtekben, mint a Pgp negatív párjában. A paclitaxel kezelés megnövelte az 18FDG felvételt a Pgp pozitív és negatív sejtekben egyaránt, a 11C-kolin PET tumordiagnosztikai tracer felvételét viszont a kezelés nem befolyásolta. A 99mTc-MIBI Pgp szubsztrát akkumulációjának mértéke a vizsgált A2780AD Pgp pozitív sejtekben szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a Pgp negatív párjában. A 99mTc-MIBI akkumulációját a paclitaxel kezelés Pgp függő és Pgp független módon is befolyásolta. Következtetésként levonhatjuk, hogy a paclitaxel kezelés különböző mechanizmusok szerint befolyásolhatja a tumordiagnosztikai tracerek akkumulációját, amit a helyes diagnózis felállításánál figyelembe kell venni. Az agyi FDG-PET-vizsgálatok kvantitálására leggyakrabban alkalmazott három tracer-kinetikai módszer összehasonlító analízisét végeztük el. Korrelációs analízis segítségével kimutattuk, hogy az egyszerűbb modellek eredményei a Phelps- modell alapján nyert adatok becslésére a kiválasztott agyi régiók jellegétől függő mértékben használhatók. Megállapítottuk, hogy mindkét egyszerűsített modell ugyanazon agyi régióknál vezet a legnagyobb torzításokhoz. A torzított becslés valószínű magyarázata az, hogy az egyszerűsítő modellek elhanyagolják az FDG-6P defoszforilációjának mértékét és nem számolnak azzal a virtuális szöveti radiofarmakon mennyiséggel, ami a közeli vaszkuláris képletek radioaktivitása miatt járulékként megjelenik a viszonylag rossz felbontóképességgel nyert PET-képek szöveti radioaktivitás eloszlási mintázataiban. ----- In our experiments we detected the presence and measured the function of the P-glycoprotein using fluorescence and isotope techniques. We showed for the first time in clinical samples that the Pgp is present to different extents in the in the cells derived from the ascites of patients with ovarian cancer. The percentage of Pgp positive cells in the ascites of patients treated with chemotherapy was between 10-79%. The expression of the Pgp pump was proved by indirect immunofluorescens method, while the function by the detection of the accumulation of R123 fluorescence dye in the cells. We found strong correlation between the rate of the expression and the function of the protein. We observed higher 18FDG PET radiotracer accumulation in the Pgp+ human adenocarcinoma-derived ovarian cell line A2780AD than its P-gp- counterpart A2780. Paclitaxel treatment further enhanced the difference in 18FDG accumulation but did not influence the accumulation of the 11C-choline tumor-diagnostic PET radiotracer. The accumulation of the 99mTc-MIBI Pgp substrate and SPECT radiotracer was significantly lower in the A2780AD Pgp+ cells than in their Pgp- counterparts. Paclitaxel treatment influenced the accumulation of 99mTc-MIBI on Pgp dependent and Pgp independent way. Based on our observations we may draw the conclusion that paclitaxel treatment influences the accumulation of the tumor-diagnostic tracers in different ways in Pgp positive and negative cells which should be taken into consideration upon coming to correct diagnostic decision. We carried out detailed analyses of the same set of data using three different methods to quantitate the FDG accumulation in different regions of the human brain. Using correlation analyses we proved, that the simplifying methods such as the SUV and Patlak methods can only be used in certain regions of the brain with good correlation to the general Phelps method. We also proved that both of the simplifying methods lead to distortion in the same regions of the brain. A possible reason of the distortion is that the simplifying methods do not take into consideration the degree of dephosphorilation of FDG-6P and the virtual appearance of the drug which can be relatively high in the vicinity of vascular compartments.	en
dc.description.degree	PhD
dc.format.extent	92	en
dc.format.extent	160176 bytes
dc.format.extent	110609 bytes
dc.format.extent	21051 bytes
dc.format.extent	1315579 bytes
dc.format.extent	182784 bytes
dc.format.extent	94720 bytes
dc.format.extent	32256 bytes
dc.format.extent	3569664 bytes
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/msword
dc.format.mimetype	application/msword
dc.format.mimetype	application/msword
dc.format.mimetype	application/msword
dc.identifier.opac	http://webpac.lib.unideb.hu:8082/WebPac/CorvinaWeb?action=cclfind&resultview=longlong&ccltext=idno+bibDEK00625991
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/2437/3101
dc.language.iso	hu	en
dc.language.iso	en	en
dc.subject	multidrog rezisztencia	en
dc.subject	multidrug resistance	en
dc.subject	P-glikoprotein	en
dc.subject	P-glycoprotein	en
dc.subject	petefészek tumor	en
dc.subject	ovary tumor	en
dc.subject	ascites	en
dc.subject	paclitaxel	en
dc.subject	18FDG	en
dc.subject	99mTc-MIBI	en
dc.subject	11C-kolin	en
dc.subject	11C-choline	en
dc.subject	pozitron emissziós tomográf (PET)	en
dc.subject	positron emission tomography (PET)	en
dc.subject	glükóz metabolizmus	en
dc.subject	glucose metabolism	en
dc.subject	kinetikai modellek	en
dc.subject	kinetic modells	en
dc.subject.discipline	Klinikai orvostudományok	hu
dc.subject.dspace	DEENK Témalista::Orvostudomány::Farmakológia	hu
dc.subject.dspace	DEENK Témalista::Orvostudomány::Onkológia	hu
dc.subject.dspace	DEENK Témalista::Orvostudomány::Szülészet, nőgyógyászat	hu
dc.subject.mesh	Ovarian Neoplasms	en
dc.subject.mesh	Drug Resistance, Multiple	en
dc.subject.mesh	P-Glycoprotein	en
dc.subject.mesh	Positron-Emission Tomography	en
dc.subject.mesh	Technetium Tc 99m Sestamibi	en
dc.subject.mesh	Fluorodeoxyglucose F18	en
dc.subject.mesh	Ascites	en
dc.subject.mesh	Glucose -- metabolism	en
dc.subject.mesh	Paclitaxel -- pharmacology	en
dc.subject.mesh	Choline	en
dc.subject.sciencefield	Orvostudományok	hu
dc.title	Multidrog rezisztenciát okozó P-glikoprotein kimutatása és funkciójának vizsgálata humán tumorból származó mintákban	en
dc.title.translated	Quantitative and functioanl analysis of MDR1/P-glycoprotein from human tumors	en