Szőlőmag őrleményt tartalmazó külsőleges készítmények formulálása és in vitro vizsgálata
Absztrakt
Kísérletes munkánk elsődleges célkitűzése olyan szőlőmag őrleményt tartalmazó krém formulálása volt, amely kedvező hatóanyagleadással rendelkezik, és amelyből a biológiailag aktív összetevő megfelelő mértékben penetrál a membránon keresztül. A munkánk során a szőlőmag őrleményből 5 és 10 %-os kivonatot készítettünk és ebből egy megfelelő konzisztenciával rendelkező szőlőmag őrleményt tartalmazó o/v emulziós rendszerű krémet formuláltunk. Az elkészített krémek cellulóz-acetát szintetikus membránon keresztül történő diffúziójának mértékét vizsgálva azt az eredményt kaptuk, hogy míg 15 perc után az 5 %-os kivonatot tartalmazó kenőcs bizonyult hatásosabbnak, addig 60 perc után egyértelműen a 10%-os kivonatot tartalmazó mintában volt a legmagasabb a proantocianidin mennyisége (3,46 μg). A kísérlet során azt is megállapítottuk, hogy a kivonat készítése során alkalmazott 1 hetes „áztatás” nem befolyásolta jelentős mértékben a penetrációt. Irodalmi adatok alapján a szőlőmag jelentős antioxidáns hatással bír, melyet DPPH antioxidáns teszttel bizonyítottunk. Az abszorbancia értékeket összehasonlítva a 10 %-os extraktum mutatkozott a legjobb antioxidásnak, ez a minta rendelkezett a legalacsonyabb (0,001) abszorbancia értékkel (az abszorbancia értékek fordítottan arányosak az antioxidáns képességgel, tehát minél alacsonyabb egy minta abszorbancia értéke, annál jobb az antioxidáns képessége). A DPPH-mérés során is a 10 %-os szőlőmag őrleményt tartalmazó kivonat ígérkezett hatásosabbnak, a legnagyobb %-ban (99,72 ± 0,33 %) ez a minta semlegesítette a szabadgyököket. Szerettünk volna arról is megbizonyosodni, hogy a szőlőmag őrlemény kivonatot tartalmazó készítmény nem jelent toxikus veszélyt a bőrre nézve. Ennek érdekében HaCaT sejteken in vitro sejtéletképességi vizsgálatot végeztünk el. Az MTT teszt során a mintanyeréshez a Franz diffúziós cellát használtuk fel és receptorközegként PBS oldatot alkalmaztunk a cellákban. Eredményeink szerint megállapítható, hogy mind a szőlőmag kivonatok mind a kivonatokat tartalmazó krémek biztonságosan alkalmazhatók, toxikus veszélyt nem jelentenek a bőrre. A legmagasabb sejtéletképességi értéket (100 %) az 5 % szőlőmag őrlemény kivonatot tartalmazó kenőcs mutatta. Formulálás során célunk volt még az is, hogy a bőr természetes pH értékéhez (4,0-6,0) közel eső kenőcsöt készítsünk. A pH-t digitális pH-mérő segítségével, potenciometriásan határoztuk meg. A vizsgálat eredménye megfelelt elvárásainknak, mivel a készítményünk pH-ja 5,95 lett. Mindezek alapján elmondható, hogy sikerült egy megfelelő hatóanyagleadású szőlőmag őrlemény kivonatot tartalmazó készítményt formulálnunk, amely antioxidáns hatásának köszönhetően képes az oxidatív károsodással szemben védelmet nyújtani, ezáltal gátolva a sejtöregedést. Továbbá ezen hatása révén képes megóvni a bőrt környezetünk által okozott sejtkárosodástól, képes a sötét foltok és ráncok megjelenését csökkenteni, továbbá a sebgyógyulásra is jótékony hatással van.