CRISPR CAS9 alapú genomszerkesztő technológiák alkalmazása a sejtvonal fejlesztésben

dc.contributor.advisorZahuczky, Gábor
dc.contributor.advisorKeresztessy, Zsolt
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.advisordeptUD-GenoMed Kft.hu_HU
dc.contributor.advisordeptBiokémiai és Molekuláris Biológiai Intézethu_HU
dc.contributor.authorJebudánszki, Vivien
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentPócsi, István
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Természettudományi és Technológiai Karhu_HU
dc.contributor.opponentdeptBiotechnológiai és Mikrobiológiai Tanszékhu_HU
dc.date.accessioned2017-02-07T09:31:08Z
dc.date.available2017-02-07T09:31:08Z
dc.date.created2016
dc.description.abstractA diplomamunkámba a CRISPR Cas9 alapú genomszerkesztő technológiák alkalmazását mutattam be a sejtvonal fejlesztés területén közben egy kevés betekintést nyújtottam a sejttenyészet, plazmid klónozás, izolálás, transzformálás, transzfektálás, illetve a különböző PCR technikákba. A kutatócsoportunk célja a CRISPR-CAS9 technológia beállítása 3T3-L1 modell sejtvonal esetében, a VEGFa gén CTCF régiójában célzott genom szintű módosítások végrehajtására volt. Hosszútávú célunk volt, hogy a rendszert hatékonyan tudjuk működtetni, amihez egy egér eredetű, immortalizát, fibroblaszt sejtvonalat a 3T3- L1-et választottuk. A vizsgálathoz először is nélkülözhetetlen volt 3T3-L1 sejteket növeszteni, illetve ezeket a sejtvonalakat fenntartani. Célunk volt a guide RNS klónozása a célplazmidba, annak hatékony transzfektálása és a genom szintű változások kimutatása. A munkánk során kijelenthettük, hogy sikeresen klónoztuk az sgRNS-eket a célplazmidokba, amelynek termelését és tisztítását is sikeresen véghezvittük. Összességében elmondható, hogy a CRISPR rendszer gyors és hatékony működéséhez is feltétlen szükséges a megfelelő optimalizálás, ami a világszerte gyorsan gyarapodó cikkek és tapasztalatok alapján egyre könnyebben megoldható leszhu_HU
dc.description.coursemolekuláris biológiahu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.coursespecGenetikahu_HU
dc.description.degreeMSc/MAhu_HU
dc.format.extent38hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/234988
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectgenomszerkesztéshu_HU
dc.subjectCRISPR Cas9hu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudományhu_HU
dc.titleCRISPR CAS9 alapú genomszerkesztő technológiák alkalmazása a sejtvonal fejlesztésbenhu_HU
Fájlok