ASPRV1 és filaggrin expresszió vizsgálata HaCaT sejtek differenciáltatása során

dc.contributor.advisorTőzsér, József
dc.contributor.advisorNagy, Katalin
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.advisordeptBiokémiai és Molekuláris Biológiai Intézethu_HU
dc.contributor.authorKapczár, Dóra
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentTar, Krisztina
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentdeptOrvosi Vegytani Intézethu_HU
dc.date.accessioned2016-05-23T08:51:26Z
dc.date.available2016-05-23T08:51:26Z
dc.date.created2016
dc.description.abstractA keratinocitákban differenciálódás és seb regenerálódás során expresszálódó bőr specifikus aszpartil proteáz 1 (ASPRV1) proteáz természetes szubsztrátja a filaggrin doménekből felépülő profilaggrin prekurzor molekula. A filaggrin fehérje egy szerkezeti fehérje, melyet a bőrben található transzglutaminázok keresztkötnek a keratin tartalmú citoszkeletális vázzal. A profilaggrin fehérje doménjei közötti összekötő szekvencia hasításáért az ASPRV1 proteáz felelős, az így keletkező filaggrin további degradációs folyamatok következtében természetes hidratációs faktorokká érik, melyek feladata a bőr hidratációja és a környezeti hatásokkal szembeni védelem. Vizsgálataink során arra voltunk kíváncsiak, hogy az immortalizált humán keratinocita HaCaT sejtek differenciáltatása során hogyan változik a filaggrin és az ASPRV1 fehérjék expressziója. Mikroszkóppal követtük a morfológiai és Western blottal vizsgáltuk a biokémiai változásokat. Filaggrin és ASPRV1 ellenes antitesteket alkalmaztunk a cél fehérjék vizsgálatához. A HaCaT sejtek differenciálatlan állapotának fenntartását csökkentett Ca2+ tartalmú (0,2 mM) tápfolyadékkal értük el. A differenciált állapot létrehozásához magasabb Ca2+ tartalmú (1,4 mM) tápfolyadékot alkalmaztunk, 11 napos intervallumban. Az irodalomban leírt morfológiai változásokat a mikroszkópos vizsgálatok során tapasztaltuk. A differenciáltatásos kísérlet során detektáltuk a prekurzor profilaggrin expresszióját és filaggrin fehérjék megjelenését. Csökkentet és magas Ca2+ tartalmú tápfolyadékban HaCaT sebzéses kísérletet végeztük 5 napos intervallumban, mellyel a mechanikai sérülés hatását és a sejt regenerálódást vizsgáltuk. Az ASPRV1 fehérje megjelenésével a profilaggrin processzálását és mennyiségének csökkenését vártuk, valamint a processzálás következtében a rövidebb, kisebb molekulatömegű proteolitikus fragmentek megjelenését.hu_HU
dc.description.courseorvosdiagnosztikai laboratóriumi analitikushu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.coursespecOrvosdiagnosztikai laboratóriumi analitikahu_HU
dc.description.degreeBSc/BAhu_HU
dc.format.extent35hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/227844
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectASPRV1hu_HU
dc.subjectfilaggrinhu_HU
dc.subjectHaCaThu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományok::Molekuláris biológiahu_HU
dc.titleASPRV1 és filaggrin expresszió vizsgálata HaCaT sejtek differenciáltatása soránhu_HU
Fájlok