Investigation of UVB-induced cellular mechanisms in human keratinocytes using a novel approach of delivering in vitro synthesized mRNA encoding cyclobutane pyrimidine dimer-specific photolyase

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorEmri, Gabriella
dc.contributor.authorBoros, Gábor
dc.contributor.departmentEgészségtudományok doktori iskolahu
dc.contributor.submitterdepDE--Általános Orvostudományi Kar -- Bőrgyógyászati Klinika
dc.date.accessioned2015-11-04T11:26:56Z
dc.date.available2015-11-04T11:26:56Z
dc.date.created2015hu_HU
dc.date.defended2015-12-02
dc.description.abstractAz ultraibolya B (UVB) (280-315 nm) sugárzás a legfőbb környezeti kockázati tényezője a napégés, a bőröregedés és a bőrrák kialakulásának. Az UVB sugárzás által indukált ártalmas biológiai hatások közvetítéséért elsősorban a ciklobután pirimidin dimerek (CPD) felelősek, amelyek a leggyakoribb és egyben a legkárosabb UVB-okozta DNS károsodások. Az UVB által előidézett CPD fotoproduktumok hosszan tartó jelenléte a bőr sejtjeiben gyulladásos folyamatok indukálásához, immunszuppresszióhoz, illetve mutációhoz, ezáltal bőrtumorok és egyéb bőrbetegségek kialakulásához vezethet. A CPD-k hozzájárulása a sejtek génexpressziós és funkcióbeli változásaihoz még nem teljesen tisztázott. Ezidáig nem volt olyan megfelelő kísérleti eljárás, amely képes lett volna specifikusan azonosítani a CPD-függő géneket humán sejtekben, ezáltal elkülöníteni a CPD-k által szabályozott celluláris folyamatokat más, UVB indukálta molekuláris eseményektől. A CPD-specifikus fotoliáz fehérje képes gyorsan és hatékonyan felismerni és kijavítani a CPD-ket egy gyors, fényfüggő reakcióban, amelyet “fotoreaktivációnak” nevezünk. Mivel a méhlepényes emlősök, beleértve az embert is, ilyen DNS-javító enzimmel nem rendelkeznek, a CPD károsító hatásaival szemben kizárólag a nukleotid excíziós reparációs (NER) rendszer lassú és kevésbé hatékony működésére számíthatnak. A hipotézisünk az volt, hogy a CPD-specifikus fotoliáz fehérjét expresszáló humán keratinociták jó modellrendszerként használhatók az UVB indukálta celluláris folyamatok tanulmányozására. A vizsgálni kívánt nem humán fehérje tranziens expresszálására in vitro szintetizált mRNS-alapú génterápiás módszert alkalmaztunk. Ezen kísérleti eljárás segítségével az UVB által előidézett pirimidin dimerek reparációjának tanulmányozása mellett, lehetőség nyílt a CPD-függő és -független molekuláris mechanizmusok elkülönítésére is.hu_HU
dc.description.abstractUltraviolet B (UVB) (280-315 nm) radiation is the main environmental risk factor for sunburn, skin carcinogenesis and premature skin aging. Major biological effects of UVB radiation are attributed to cyclobutane pyrimidine dimers (CPDs), which are the most frequently formed deleterious DNA photolesions. CPDs have been shown to induce inflammation, immune suppression and mutations that may lead to melanoma and non-melanoma skin cancers. However, so far, it has been unclear how CPDs change gene expression and cell activities. Until now, there was no suitable experimental platform to identify directly CPD-responsive genes in human cells, thus distinguish CPD-regulated cellular mechanisms from those mediated by other UVB-induced derivatives, including diverse photoproducts, reactive oxygen species, cross-linked protein-DNA and other damaged macromolecules. The integrity of DNA can be quickly restored by a light-activated photolyase, which splits the CPDs using the energy of visible light in a process called „photoreactivation”. However, this DNA repair enzyme is absent in placental mammals, including humans, that must rely on the slower and less accurate nucleotide excision repair (NER) system to repair UV-induced DNA-lesions. Our scientific idea was to transiently express functional CPD-specific photolyase in cultured human keratinocytes using a novel in vitro transcribed (IVT) mRNA-based gene therapy method, as a platform to distinguish CPD-dependent and -independent events of UVB-induced cellular responses.hu_HU
dc.description.correctorde
dc.format.extent78hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/217908
dc.language.isohuhu_HU
dc.language.isoenhu_HU
dc.subjectin vitro szintetizált mRNShu_HU
dc.subjectin vitro synthesized mRNAhu_HU
dc.subjectpszeudouridin
dc.subjectUVB sugárzás
dc.subjectciklobután pirimidin dimer-specifikus fotoliáz
dc.subjectDNS reparáció
dc.subjectpseudouridine
dc.subjectultraviolet B
dc.subjectcyclobutane pyrimidine dimer-specific photolyase
dc.subjectDNA repair
dc.subject.disciplineEgészségtudományokhu
dc.subject.sciencefieldOrvostudományokhu
dc.titleInvestigation of UVB-induced cellular mechanisms in human keratinocytes using a novel approach of delivering in vitro synthesized mRNA encoding cyclobutane pyrimidine dimer-specific photolyasehu_HU
dc.title.translatedAz UVB sugárzás által előidézett celluláris folyamatok vizsgálata humán keratinocitákban, in vitro szintetizált ciklobután pirimidin dimer-specifikus fotoliáz fehérjét kódoló mRNS alkalmazásávalhu_HU
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 4 (Összesen 4)
Nem elérhető
Név:
Boros_Gabor_ertekezes.pdf
Méret:
3.75 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Disszertáció, PhD thesis
Letöltés
Nem elérhető
Név:
Boros_Gabor_tezis_magyar.pdf
Méret:
1.13 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
tézis magyar nyelven, short thesis in Hungarian
Letöltés
Nem elérhető
Név:
Boros_Gabor_tezis_angol.pdf
Méret:
1.08 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
tézis angol nyelven, short thesis in English
Letöltés
Nem elérhető
Név:
Boros_Gabor_meghivo.pdf
Méret:
127.46 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
meghívó, invitation letter
Letöltés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nem elérhető
Név:
license.txt
Méret:
1.93 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Egészségtudományok Doktori Iskola