Mutáns HIV-2 Proteáz In vitro tanulmányozása

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorTőzsér, József
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézethu_HU
dc.contributor.authorSzojka, Zsófia Ilona
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentSzabó, Attila
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Immunológiai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2015-06-12T11:01:47Z
dc.date.available2015-06-12T11:01:47Z
dc.date.created2015
dc.description.abstractA Humán Immundeficiencia Vírus 2 az AIDS (Szerzett Immundeficiencia Tünetegyüttes) betegség kialakulásáért felelős retrovírus, mely főleg Nyugat-Afrikában fertőz. A retrovírusok jellemző replikációs ciklussal rendelkeznek, amit 3 fő virális enzim szabályoz: a reverz transzkriptáz, az integráz és a proteáz. A proteáz feladata a megfelelő poliprotein láncok hasítása, ezáltal a vírus aktiválása, így létrehozva a fertőzőképes utódvírusokat. A jelenlegi proteáz inhibítorok a HIV-1 proteázra vannak kifejlesztve és a HIV-2-re vonatkozólag az ismereteink hiányosak. Munkánk során dupla mutáns ( HIV-2- proteáz szakaszt alkalmaztunk. Ezen mutációk gyakran előfordulhatnak proteáz inhibítorral kezelt betegeknél. A proteázt kódoló szakaszt a pET11-a vektor tartalmazta. A konstruktot BL21(DE3) Escherichia coli sejtekben transzformáltuk. A termelődött fehérjét reverz-fázisú kromatográfiás módszerrel tisztítottuk meg. Az így nyert frakciókat 16 %-os SDS-PAGE gélen detektáltuk. A tisztított fehérje aktivitását a HIV-2 proteáz természetes hasítási helyével analóg szekvenciájú szintetikus oligopeptid szubsztrát ( ) segítségével igazoltuk. A proteáz aktivitását, illetve a gátlási teszteket HPLC-s módszer segítségével végeztük. In vitro kísérleteink során a klinikumban is alkalmazott proteáz inhibítorokat használtunk: indinavir, nelfinavir, lopinavir, atazanavir, saquinavir, tipranavir, darunavir, ritonavir és amprenavir. Eredményeinket a korábbi HIV-2 vad típusú proteázzal elvégzett kísérletek során kapott adatokkal hasonlítottuk össze. Ezek alapján az I54M, L90M szubsztitúciók jelenléte jelentős mértékben csökkentette az inhibítorok hatékonyságát, kivéve a tipranavirt. Kísérleteink értékes információkkal szolgálhatnak a kettős mutáció proteáz-inhibitorokkal szembeni hatásáról.hu_HU
dc.description.correctorP.J.
dc.description.coursemolekuláris biológiahu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.coursespecImmunológia, sejt- és mikrobiológiahu_HU
dc.description.degreeMSc/MAhu_HU
dc.format.extent36hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/214181
dc.language.isohuhu_HU
dc.rightsCC0 1.0 Universal*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/*
dc.subjectHIV-2 Proteázhu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudományhu_HU
dc.titleMutáns HIV-2 Proteáz In vitro tanulmányozásahu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)