The role of osteopontin expression during malignant melanoma progression.

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorBalázs, Margit
dc.contributor.authorKiss, Tímea
dc.contributor.departmentEgészségtudományok Doktori Iskolahu
dc.date.accessioned2024-03-25T07:50:46Z
dc.date.available2024-03-25T07:50:46Z
dc.date.created2023
dc.date.defended2024-04-17
dc.description.abstractAz oszteopontin (OPN) egy olyan multifunkcionális glükofoszfoprotein, mely számos daganat progressziójában fontos szerepet játszik. Elősegítheti a daganatos sejtek migrációját, döntő szerepet játszik a sejtadhézióban és szoros összefüggést mutat a metasztázisok jelenlétével. Korábbi génexpressziós vizsgálataink szerint a rosszabb prognózisú melanomákban a legmagasabb expressziós szintet az OPN gén mutatta. Ezért célul tűztük ki az OPN daganat progresszióban betöltött szerepének tanulmányozását eltérő viselkedésű melanomák és különböző eredetű melanoma sejtvonalak segítségével. Vizsgáltuk az OPN molekulához kapcsolódó egyik fő szignalizációs útvonalban részt vevő NF-κβ p65 fehérje kifejeződését eltérő biológiai viselkedésű humán melanoma sejtvonalakon immunfluoreszcens jelölés segítségével. A génexpressziós adataink jó korrelációt mutattak munkacsoportunk előzetes mRNS expressziós értékeivel. A fehérje kifejeződését a vizsgált primer melanomák 90%-ában kimutattuk. Klinikai adatokkal történt korrelációs analízisünk szerint a fokozódó OPN-expressziós szintek kedvezőtlenül befolyásolják a betegség kimenetelét. In vitro kísérleteinkben NF-κβ p65 fehérje sejtmagi lokalizációját figyeltük meg egy magas OPN szintet mutató sejtvonalban. Az OPN gén csendesítése során az mRNS szint csökkenését tapasztaltuk. Továbbá megfigyeltük, hogy a transzfektált sejtvonal invazív képessége csökkent az eredeti sejtvonalhoz képest. A fehérje expressziós vizsgálataink során a tanulmányozott fehérjék többségénél csökkent expressziót figyeltünk meg az OPN csendesített sejtvonalakban. Megállapíthatjuk, hogy az OPN emelkedett szintje jelentősen hozzájárul a daganatsejtek progressziójához, a metasztázisképzéshez, ezért melanomákban is fontos biomarkernek tekinthető. A géncsendesítést követően az OPN mRNS szint mellett a fehérje expressziója, valamint a sejtek invazív képessége is csökkent, ezért feltételezhetjük, hogy az OPN fontos lehet a melanoma terápia optimalizálásában.
dc.description.abstractOsteopontin (OPN), a multifunctional glycophosphoprotein, plays different roles during cancer progression. In addition, to multiple intra- and extracellular functions, it facilitates migration of tumour cells, has crucial role in cell adhesion and is associated with increased metastasis formation. In our previous gene expression studies the OPN showed the highest expression level in melanomas with poor clinical outcome. The aim of the present study was to validate our previous microarray data. We also investigated OPN expression, cellular localization and its relationship with NF-κβ protein levels in primary and metastatic melanoma cell lines by immunohistochemistry. Therefore, the purpose of this study was to further characterize the function of OPN in tumorigenesis using melanoma cell lines and siRNA-mediated knockdown of OPN. We verified our results by qRT-PCR and immunhistochemistry on tissue microarray and observed that more than 50% of tissues showed high protein expression and was significantly associated with poor prognosis. We applied qRT-PCR to identify high levels of OPN expression in the majority of cell lines. Our in vitro experiments, nuclear translocation of the NF-κβ p65 protein was observed in a cell line with high OPN expression. siRNA-mediated OPN knockdown led to decreased OPN expression in melanoma cell lines, which was associated with decreased cell proliferation and invasion. Proteome Profiler Oncology Array was used to determine protein expression patterns of original and transfected cell lines pairs and we found significantly different protein expression. In summary, we showed that a high expression level of OPN is associated with a more aggressive phenotype in melanoma. Our results revealed for the first time that silencing the OPN gene influences proliferation and invasion of melanoma cells by effecting EGFR, tenascin C, survivin, galectin-3 and enolase 2 expression. Taken together these data suggest that OPN might be an ideal target for drug development and therapies.
dc.description.correctorhbk
dc.format.extent86
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/367809
dc.language.isoen
dc.language.isohu
dc.subjectmalignant melanoma
dc.subjectmalignus melanoma
dc.subjectosteopontin expression
dc.subjecttissue microarray
dc.subjectRNA interference
dc.subjectOPN knockdown
dc.subjectprotein expression profile
dc.subjectinvasion
dc.subjectproliferation
dc.subjectoszteopontin expresszió
dc.subjectszöveti microarray
dc.subjectRNS interferencia
dc.subjectOPN géncsendesítés
dc.subjectfehérje expressziós profil
dc.subjectinvázió
dc.subjectproliferáció
dc.subject.disciplineEgészségtudományokhu
dc.subject.sciencefieldOrvostudományokhu
dc.titleThe role of osteopontin expression during malignant melanoma progression.
dc.title.translatedAz oszteopontin expresszió szerepe a malignus melanoma progressziójában.
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 4 (Összesen 4)
Nem elérhető
Név:
Kiss Timea_ertekezes.pdf
Méret:
4.41 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nem elérhető
Név:
Kiss_Timea_tezis_angol.pdf
Méret:
1.14 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nem elérhető
Név:
Kiss_Timea_tezis_magyar.pdf
Méret:
1.75 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nem elérhető
Név:
Kiss_Timea_Meghivo.pdf
Méret:
254.05 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nem elérhető
Név:
license.txt
Méret:
1.93 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Egészségtudományok Doktori Iskola