Az Aspergillus fumigatus fonalas gomba Afu3g10930 gén kiütéséhez használandó plazmidkonstrukció elkészítése

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorBenkő, Zsigmond
dc.contributor.authorNkula, Andre Nickson
dc.contributor.departmentDE--Természettudományi és Technológiai Kar--Biotechnológiai Intézet
dc.date.accessioned2022-12-16T08:21:49Z
dc.date.available2022-12-16T08:21:49Z
dc.date.created2022-12-15
dc.description.abstractA konstrukció létrehozásához első lépésben digitális úton megterveztük a konstrukciót a Benchling online felületén. Így azt is tudtuk milyen enzimekre lesz szűkségünk munkánk során. A genomi DNS izolációját követően PCR-rel felsokszorosítottuk homológ szakaszainkat és a Hygromycin szekvenciákat. A pYTK001 plazmidot a HincII enzim segítségével lineraizáltuk majd beépítettük ez fragmenseinket Upstream homológ, Hygormycin és Downstream homológ sorrendben. A fragmensek összeállításához a NEBuilder HiFi DNS Assembly Master Mix-et használtuk. Ezek után a plazmidokat E.coli sejtekbe transzformáltuk. Az sfGFP rioporter gén jóvoltából UV fény alatt ellenőrizni tudtuk azokat a telepeket, melyekbe nem épült be a plazmid. További ellenőrzés végett a transzformált telepeket is megvizsgáltuk. Ehhez ScaI és XhoI enzimek emésztésére volt szűkség. Az így kapott fragmentjeinket újra megvizsgáltuk géleketroforézissel. Végeredményként sikerült olyan telepeket növeszteni, melyek a megfelelő sorrendben tartalmazzák a fragmenteket. Így ezek a konstruciók felhasználhatóak a következőkben Aspergillus fumigatus fonalas gomba transzformálásra. Ezáltal az Afu3g10930 deléciós mutánsokban vizsgálható lesz ez a génfunkció.
dc.description.correctorLB
dc.description.courseBiotechnológia
dc.description.degreeMSc/MA
dc.format.extent36
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/342940
dc.language.isohu
dc.rights.accessHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.
dc.subjectaspergillus
dc.subjectfumigatus
dc.subjectHiFi
dc.subjectgenomszeresztés
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományok
dc.titleAz Aspergillus fumigatus fonalas gomba Afu3g10930 gén kiütéséhez használandó plazmidkonstrukció elkészítése
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Biotechnológiai Intézet)