Adenozin 2A receptor izolálása és kifejeződésének vizsgálata LPS aktivált egér makrofág sejtekben

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorKókai, Endre
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.advisordeptOrvosi Vegytani Intézethu_HU
dc.contributor.authorSzinai, Mihály
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentSzondy, Zsuzsa
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Fogorvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentdeptFogorvosi Biokémiai nem önálló Tanszékhu_HU
dc.date.accessioned2017-06-26T11:11:33Z
dc.date.available2017-06-26T11:11:33Z
dc.date.created2017-04-04
dc.description.abstractAz adenozin egy adenin és egy ribóz molekulából felépülő nukleozid. Az adenozin a szervezetben nemcsak az ATP és a cAMP építőeleme, hanem számos élettani folyamatban is szabályozó szerepet játszik. Az adenozin receptoroknak 4 altípusát különböztetjük meg: A1, A2A, A2B és A3. Munkacsoportunk az adenozin gyulladásos folyamatokban betöltött szerepét tanulmányozza egér makrofág sejteken. A monocita/makrofág differenciálódás során mind a 4 típusú adenozin receptor megjelenik a sejtek felszínén. A gyulladásos folyamatokban az adenozin receptorok aktivációja immunszupresszív hatást eredményez. A hatás kialakításáért elsősorban az A2A receptor által mediált jelátviteli útvonal a felelős. Az A2A, a receptor-család többi tagjától eltérően, rendelkezik egy intracelluláris, 120 aminosav hosszúságú C-terminális doménnel. Korábban munkacsoportunk kimutatta az A2A C-terminális domén és a katepszin D proteáz kölcsönhatását makrofág sejtekben. Ezen kísérleti eredmény alapján felmerült bennünk a kérdés, hogy az A2A C-terminális doménje szubsztrátja lehet-e a katepszin D proteáznak. Munkánk célja az volt, hogy izoláljuk az A2A receptort emlős sejtekből, továbbá az izoláláshoz kidolgozott módszer segítségével nyomon kövessük a receptor mennyiségének és lokalizációjának változását egér lipopoliszacharid (LPS) aktivált makrofág sejtekben. Kísérleteink során első lépésben az A2A fehérje kimutatását végeztük el LPS aktivált makrofág sejtekben Western blot módszer alkalmazásával. Miután igazoltuk az A2A receptor elleni antitest specifikusságát, felhasználtuk a receptor izolálására immunprecipitáció módszer alkalmazásával. Az A2A receptor lokalizációjának változását a makrofágok aktiválása során immunfestéssel vizsgáltuk. Kísérleteink eredménye alapján elmondhatjuk, hogy kimutattuk az A2A receptor jelenlétét LPS aktivált RAW264.7 jelű makrofág sejtekben. Az A2A receptor specifikus oligopeptid alkalmazásával igazoltuk, hogy az alkalmazott antitest az A2A fehérjére specifikus és alkalmazható a receptor izolálására és lokalizációjának nyomon követésére. Az immunfestés denzitometriás kiértékelése során megállapítottuk, hogy LPS kezelés hatására szignifikánsan megnő az A2A receptor kifejeződése.hu_HU
dc.description.coursemolekuláris biológiahu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.coursespecBiokémia-genomikahu_HU
dc.description.degreeMSc/MAhu_HU
dc.format.extent39hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/242184
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectadenozinhu_HU
dc.subjectmakrofághu_HU
dc.subjectLPShu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudományhu_HU
dc.titleAdenozin 2A receptor izolálása és kifejeződésének vizsgálata LPS aktivált egér makrofág sejtekbenhu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)