dc.contributor.advisor	Boratkó, Anita
dc.contributor.author	Király, Nikolett
dc.contributor.authorvariant	Király, Nikolett
dc.contributor.department	Molekuláris orvostudomány doktori iskola	hu
dc.contributor.submitterdep	DE--Általános Orvostudományi Kar -- Orvosi Vegytani Intézet
dc.date.accessioned	2022-03-22T11:50:18Z
dc.date.available	2022-03-22T11:50:18Z
dc.date.defended	2022-04-08
dc.date.issued	2022
dc.description.abstract	Endotél sejtekben a Ser/Thr specifikus foszfatázok közül az egyik legjelentősebb a PP1 enzim, mely egy katalitikus és egy célra irányító regulátor alegységből áll. Ilyen regulátor alegység család a miozin foszfatáz regulátor alegység, azaz MYPT fehérje család, melynek tagja az endotél sejtekben magas expresszió szinttel rendelkező TIMAP fehérje. A TIMAP endotél sejtekben betöltött funkciójának vizsgálatakor, új kölcsönható partnerének keresése során az ANXA2 fehérjét azonosítottuk. Kimutattuk, hogy az ANXA2 Ser25 oldalláncának foszforilációját az endotél sejtekben a PKC enzim katalizálja, valamint a defoszforilációjában a TIMAP-PP1c holoenzim játszik szerepet. Eredményeink azt bizonyítják, hogy az ANXA2 PKC-vel és PP1-gyel történő szabályozása kulcsfontosságú szerepet játszhat az endotél sejtek jelátvitelében, különösen a barrier funkcióban és a sejtmigrációban. A TIMAP fehérje Ser69-es oldallánc reverzibilis foszforilációjának vizsgálatához vad típusú foszforilációt utánzó S69D és nem foszforilálható S69A rekombináns TIMAP fehérjéket hoztunk létre. Kimutattuk, hogy a Ser69-es oldallánc foszforilációja nem befolyásolja a TIMAP PP1c-vel, ERM-el vagy RACK1 fehérjékkel való kölcsönhatását. A fehérjék lokalizációjának vizsgálatakor a foszforilációt utánzó mutánst expresszáló sejtekben a TIMAP S69D fokozott membrán lokalizációt mutatott valamint. ECIS méréseink azt igazolták, hogy az S69D mutánst expresszáló sejtek gyorsabb sebgyógyulási és migrációs sebességgel rendelkeztek. Immunprecipitációs kísérlettel a TIMAP és PLK4 kináz közötti kölcsönhatást mutattunk ki, amely feltehetően részt vehet a TIMAP Ser69-es oldalláncának foszforilációjában.	hu_HU
dc.description.abstract	In endothelial cells, PP1 enzyme is one of the main Ser / Thr-specific phosphatases, consisting of a catalytic and a targeting regulatory subunit. One type of the regulatory subunit families is the myosin phosphatase regulatory subunit (MYPT) protein family and its member protein, TIMAP has high expression level in endothelial cells. ANXA2 protein was identified in the study of TIMAP function in endothelial cells and in a search of its new interacting partners. We have shown that phosphorylation of Ser25 side chain of ANXA2 in endothelial cells is catalysed by the PKC enzyme, and the dephosphorylation of ANXA2 is mediated by TIMAP-PP1 holoenzyme. Our results demonstrate that regulation of ANXA2 by PKC and PP1 may play a role in endothelial cell signaling, especially in barrier function and cell migration. To study reversible phosphorylation of the Ser69 side chain of TIMAP protein, wild-type, phosphomimic S69D and phosphonull S69A recombinant TIMAP proteins were made. We have shown that phosphorylation of the Ser69 of TIMAP had no effect on the interaction with PP1c, ERM or RACK1 proteins. However, S69D TIMAP showed enhanced membrane localization in cells overexpressing this phosphomimic mutant form. Significantly faster wound healing and migration rate of the S69D mutant overexpressing cells were detected by endothelial barrier resistance measurements (ECIS). By immunoprecipitation experiment, specific interaction was shown between TIMAP and polo-like kinase 4 (PLK4), which may be a potential kinase to phosphorylate Ser69.	hu_HU
dc.format.extent	92	hu_HU
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/2437/329434
dc.language.iso	hu	hu_HU
dc.subject	PKC	hu_HU
dc.subject	ANXA2
dc.subject	reverzibilis fehérje foszforiláció
dc.subject	PP1
dc.subject	TIMAP
dc.subject	endotél sejtek
dc.subject	sejtmigráció
dc.subject.discipline	Elméleti orvostudományok	hu
dc.subject.sciencefield	Orvostudományok	hu
dc.title	A TIMAP, mint a protein foszfatáz 1 regulátor szerepének vizsgálata tüdő artéria endotél sejtekben	hu_HU
dc.title.translated	Investigation of the role of TIMAP as a regulator of protein phosphatase 1 in pulmonary artery endothelial cells	hu_HU
dc.type	PhD, doktori értekezés	hu

A TIMAP, mint a protein foszfatáz 1 regulátor szerepének vizsgálata tüdő artéria endotél sejtekben

Fájlok

Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)

Engedélyek köteg

Gyűjtemények