Gaucher-fenotípusú neuronok celluláris membránjaiban megjelenő biofizikai eltérések karakterizálása

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorKovács , Tamás
dc.contributor.advisorZákány , Florina
dc.contributor.advisordeptÁltalános Orvostudományi Kar::Biofizikai és Sejtbiológiai Intézet::Biofizikai Tanszék
dc.contributor.authorVigh, Barbara
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Kar
dc.date.accessioned2025-05-26T12:45:50Z
dc.date.available2025-05-26T12:45:50Z
dc.date.created2024-08-30
dc.description.abstractA lizoszómális béta-glükocerebrozidáz (GBA) örökletes deficienciája által okozott Gaucher-kór patognómikus eltérése a szubsztrát glükozilceramid (GlcCer) felhalmozódása az intracelluláris organellumok membránjában és a sejtmembránban, amely révén ezen membránok biofizikai jellemzői jelentősen megváltozhatnak, hozzájárulva a betegség patomechanizmusához. A Gaucher-kórban leginkább érintett sejtek a makrofágok mellett a neuronok, amelyek funkcionális eltérései megfelelő modellrendszer hiányában még jórészt ismeretlenek. Bár a betegségben alapvető jelentőségük lehet az intracelluláris organellumok membránjaiban megjelenő változásoknak, ezek izolált élő sejtekben történő vizsgálata rendkívül nehéz. Kísérleteinkben célul tűztük ki egy új neuronális Gaucher-modellrendszer membránbiofizikai karakterizálását. A GBA-/- egerekből származó immortalizált kortikális neuronokból álló modell validálására megvizsgáltuk a sejtmembrán GlcCer mennyiségét áramlási citometriával, majd környezeti paraméterekre szenzitív fluorofórok (TMA-DPH – fluiditás, Laurdan – hidráció, PY3174 – lipid rendezettség, illetve di-8-ANEPPS és F66 – dipólpotenciál) spektrofluorimetriás, konfokális mikroszkópos és áramlási citométeres elemzésével jellemeztük a megjelenő eltéréseket kontroll GBA+/+ sejtekhez viszonyítva. A GBA-/- neuronokban szignifikánsan megnőtt a GlcCer mennyisége, amely a membránbiofizikai paraméterek jelentős eltéréseivel társult, ugyanis a GBA+/+ neuronokhoz képest szignifikánsan lecsökkent a membránok fluiditása, illetve hidrációja, valamint megnövekedett a lipid rendezettség és a membránhoz asszociált molekuláris dipólok rendeződéséből származó dipólpotenciál mértéke. Bár spektrofluorimetriával és elsősorban áramlási citometriával jól jellemezhetők voltak a sejtszintű eltérések, konfokális mikroszkópiával elkülöníthettük a sejtmembrán és az intracelluláris membránok változásait is. Emellett a kedvező spektrális tulajdonságokkal bíró F66 kombinálhatónak bizonyult különböző specifikus organellum markerekkel, így kvantitatív képanalízis során karakterizálni tudtuk ezen organellumok membránbiofizikai eltéréseit élő sejtekben. Kísérleteink során validáltuk a GBA-/- neuronális Gaucher-fenotípusú modellrendszerünket és leírtuk az abban megjelenő membránbiofizikai változásokat. A dipólpotenciálra szenzitív F66 és specifikus organellum markerek kombinált alkalmazásával emellett lehetővé vált az intracelluláris organellumok potenciális patofiziológiai relevanciával bíró eltéréseinek
dc.description.courseáltalános orvos
dc.description.courseactnappali
dc.description.courselangmagyar
dc.description.degreeegységes, osztatlan
dc.format.extent35
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/390429
dc.language.isohu
dc.rights.accessHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.
dc.subjectGaucher-kór, konfokális mikroszkópia, membrán dipólpotenciál, membrán rendezettség, intracelluláris organellumok
dc.subject.dspaceBiológiai tudományok::Sejtbiológia
dc.titleGaucher-fenotípusú neuronok celluláris membránjaiban megjelenő biofizikai eltérések karakterizálása
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
2024_06_25_560_vigh_barbara.pdf
Méret:
1.13 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Megjelenítés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
2.35 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)