Szerző szerinti böngészés "Keller, Ilka"
Megjelenítve 1 - 10 (Összesen 10)
Találat egy oldalon
Rendezési lehetőségek
Tétel Korlátozottan hozzáférhető A magnézium-függő protein foszfatáz 1B hatása tüdő adenokarcinómábanSzalmás, Alexandra Fanni; Lontay, Beáta; Keller, Ilka; Általános Orvostudományi Kar::Orvosi Vegytani Intézet; DE--Általános Orvostudományi Kar; A TDT elnökség által kijelölt 2 titkos bírálóA daganatos megbetegedések, illetve halálozások számában a tüdődaganatok vezető szereppel bírnak. Az általunk vizsgált jelátviteli pálya egyik eleme a protein-arginin-metiltranszferáz 5 enzim (PRMT5), amely szubsztrátjainak szimmetrikus dimetilációját katalizálja. A PRMT5 szabályzó enzimei a RhoA aktivált kináz (ROK), valamint a miozin foszfatáz (MP), melyek reverzibilis foszforiláció útján szabályozzák a PRMT5 enzim aktivitását annak Thr80 oldalláncán. A ROK által foszforilált, ezáltal aktív PRMT5 szimmetrikusan dimetilálja a hiszton 2A és 4 harmadik argininjét, ezzel bizonyos gének, főként tumorszupresszorok, kifejeződését gátolva. A MP ezzel ellentétben gátolja a PRMT5 aktivitását. A miozin foszfatáz szabályozásáért annak MYPT1 szabályzó alegységének Thr853 és Thr696 oldalláncain történő foszforiláció felelős, ami ezáltal fokozza a tumorigenezist. Célkitűzésünk a MP egy feltételezett sejtmagi kölcsönható partnerének, a magnézium-függő foszfatáz 1B (PPM1B) tumorszupresszív hatásának igazolása, illetve a génexpressziót szabályozó PRMT5 és az enzimet szabályzó foszfatázok szerepének vizsgálata humán tüdődaganatban. Vizsgálati modellként A549 tüdődaganatos sejtvonalat használtunk, amelyen a PPM1B overexpressziót követően az MP/PRMT5 onkogén jelátviteli pálya elemeinek expresszióját és aktivitását elemeztük szemi-kvantitatív Western blot analízissel. A PPM1B overexpresszió eredményeképp a MYPT1 gátló foszforilációja csökkent mindkét fentebb említett oldalláncán. Ezáltal a PRMT5 foszforilációja szintén szignifikánsan csökkent, amivel összefüggésben csökkent a hiszton 2A szimmetrikus dimetilációja. Emellett vizsgáltuk azon sejtek életképességét Alamar Blue vizsgálattal, illetve migrációs képességét Scratch assay-vel amelyekben a PPM1B fehérje overexpresszálva lett. Az overexpresszió nem befolyásolta a sejtek életképességét, azonban hatással volt a sejtek migrációjára azáltal, hogy szignifikánsan csökkentette a miozin könnyűlánc (MLC) foszforilációját annak Ser19 oldalláncán. A sebzést követő High Content Screening analízis eredményei alapján azon sejtek migrációs képessége szignifikánsan csökkent, amelyben a PPM1B fehérje overexpresszálva volt. Vizsgálataink alapján igazoltuk a PPM1B ezen onkogén jelátviteli úton betöltött tumorgátló hatását in vitro A549 tüdő adenokarcinóma sejtvonalon.Tétel Szabadon hozzáférhető A miozin foszfatáz szerepe és szabályozása az uterus fiziológiás és pathológiás folyamataiban(2025) Keller, Ilka; Lontay, Beáta; Keller, Ilka; Molekuláris orvostudomány doktori iskola; Általános Orvostudományi Kar::Orvosi Vegytani IntézetA PPM1B fehérje központi szerepet játszik az MP nukleáris aktivitásának szabályozásában, mely működés elengedhetetlen az MP/PMRT5/H4 protoonkogén tengely tumorprotektív módon történő kiegyensúlyozásában. A PPM1B az egyetlen olyan protein foszfatáz, amely ezen tanulmány során bizonyított MYPT1 alegységgel kialakított kölcsönhatása révén képes a MYPT1 fehérjét a nukleuszban defoszforilálni Thr696-os oldalláncán, így elősegítve az MP működését. Ez a folyamat csökkenti a PRMT5 fehérje aktivációját, ezzel redukálva a H4 fehérje szimmetrikus dimetilációját, mely poszttranszlációs módosulás elburjánzása a proononkogén/tumorszuppresszor mérleg felborulásához vezet, csökkentve tumorszuppresszorok és növelve a protoonkogének expresszióját. Kísérleti eredményeink igazolták a PPM1B és a MYPT1 kölcsönhatását HeLa méhnyakrák eredetű sejtek citoplazmatikus és sejtmai lokalizációban egyaránt. Az SNG inhibitorral végzett vizsgálataink során megfigyeltük, hogy a PPM1B gátlása fokozta a PRMT5 aktiváló foszforilációját és a H4 hiszton szimmetrikus dimetilációját, ezen változások humán cervix carcinomából származó szöveti lizátumok vizsgálatából is igazolódtak. Ezzel szemben a PPM1B transzfekciója kivédte ezeket az elváltozásokat. A PPM1B szerepe különösen hangsúlyos humán méhnyakrák szövetekben, ahol expressziója alacsonyabb a kontroll szövetekhez képest, amely összhangban áll a korábbi kutatásokkal, amelyek a PPM1B-t tumorellenes faktorként azonosították. A kutatási eredményeink alapján a PPM1B ígéretes terápiás célpont lehet a daganatok kezelésében. Az SMTNL1 fehérjét korábban, mint szteroidhormon-függő szövetekben fellelhető PR-B ko-regulátoraként azonosították, illetve ezen tanulmány során tipizáltuk azon tulajdonságát, amit az endometriális epitélium sejtjeinek differenciációjában és az inzulin jelátvitük szabályozásában betölt, in vitro terhes és gesztációs diabétesz modellben. Az FT-SMTNL1 transzfekció progeszteronfüggő módon szabályozta a sejtek citoszkeletális elemeit, mint a MYPT1 és MLC20, amelyek molekuláris alapot biztosítottak a sejtek kontraktilitásának és migrációjának módosulására. Az FT-SMTNL1 transzfekció progeszteron függő módon gátolta a sejtek migrációját, illetve mérsékelte az inzulin rezisztenciára jellemző molekuláris változásokat az IRS-1 foszforilációjának közvetett modulálásával, melyhez igazodva nőtt a sejtek glükózfelvétele és glikogén tárolása. Ezek az eredmények alapján az SMTNL1 nemcsak az endometriális diszfunkciók, hanem az inzulinrezisztencia és daganatos betegségek terápiás célpontja is lehet. The PPM1B protein plays a crucial role in regulating the activity of MP within the nucleus, a function essential for balancing the MP/PRMT5/H4 proto-oncogene axis in a tumor-protective manner. Amongst the intranuclear interactors of MP, PPM1B is the only protein phosphatase that, due to its interaction with the MYPT1 subunit, is capable to dephosphorylate the Thr696 sidechain, thereby facilitating the tumorsuppressor function of MP. This process decreases the activation of the PRMT5 protein, hence reducing the symmetric dimethylation of the H4 protein, a post-translational modification whose upregulation unsettles the protooncogene/tumorsuppressor expression balance by reducing the expression of tumorsuppressors and increasing that of protooncogenes. Our experimental results confirmed the interaction between PPM1B and MYPT1 in the cytoplasm and nuclus of HeLa cells derived from cervix cancer. Based on our result arising from utilizing the PPM1B inhibitor SNG, we observed that the inhibition of PPM1B enhanced the activating phosphorylation of PRMT5 on the Thr80 sidechain, thereby elevating the symmetric dimethylation of H4 histones. These changes were also validated in tissue lysates derived from human cervical carcinoma biopsies. Correlatingly, PPM1B transfection prevented these alterations. The role of PPM1B is particularly crucial in human cervical cancer tissues, where its expression is lower compared to control tissues, which is consistent with previous research identifying PPM1B as a tumor suppressor factor. Based on these findings, PPM1B is a promising therapeutic target in cancer treatment. The SMTNL1 protein was previously identified as a PR-B coactivator in steroid hormone-dependent tissues. In this study, we characterized its role during the differentiation of endometrial epithelial cells and its influence on insulin signaling in in vitro models of pregnancy and gestational diabetes. FT-SMTNL1 transfection regulated cytoskeletal elements, such as MYPT1 and MLC20, in a progesterone-dependent manner, providing a molecular basis for the regulation of cell contractility and migration. FT-SMTNL1 transfection inhibited cell migration in a progesterone-dependent manner and reversed molecular changes characteristic of insulin resistance by indirectly modulating IRS-1 phosphorylation that resulted in an enhanced glucose-uptake and glycogen content of Ishikawa cells. These findings suggest that SMTNL1 could be a therapeutic target not only for endometrial dysfunctions but also for insulin resistance and cancer.Tétel Korlátozottan hozzáférhető A smoothelin-szerű 1 fehérjét mimikáló peptid hatása az endometriális epitél sejtekre terhes, illetve patológiás terhes körülményekbenFarkas, Emese Vivien; Lontay, Beáta; Keller, Ilka; DE--Természettudományi és Technológiai Kar--Biotechnológiai IntézetA terhesség alatt expresszálódó szteroid hormonok hatására jelentős változások következnek be a simaizomzatban az egész testben. A progeszteron és a 17β-ösztradiol a megfelelő nukleáris hormonreceptoraihoz kötődik, koordináltan megváltoztatva a génexpressziós mintázatokat a megfelelő célszövetekben. Az összes simaizom kontraktilis aktivitását szabályozó fő mechanizmus a miozin könnyű lánc (MLC20) Ca2+/kalmodulin-függő miozin könnyű lánc kináz általi foszforilációja, míg a relaxációt az MLC20 miozin-foszfatáz (MP) általi defoszforilációja fejti ki. A smoothelin-szerű 1 fehérje (SMTNL1) expresszióját a terhesség olyan szövetekben indukálja, mint a méh és a vaszkuláris simaizom. Az emelkedett progeszteronszint hatására az SMTNL1 foszforilálódik a Ser-301 oldalláncán protein kináz A és G (PKA/PKG) által. Emellett az SMTNL1 fehérje citoplazmatikusan képes a MP-hoz kapcsolódni, fehérje-fehérje kölcsönhatás által gátolva a fehérje aktivitását, így szabályozva a sejtek kontraktilitását. Emellett közvetlenül befolyásolja a simaizom- és hámsejtek citoszkeletális tulajdonságait, ezáltal a trofoblasztok implantációját. Jelen kutatásunk eredményeként azt találtuk, hogy az SMTNL1 progeszteron jelenlétében fokozottan csökkenti a MP szabályozó alegységének, a MYPT1-nek az expresszióját. Továbbá egy eddig még nem jellemzett úton, annak gátló foszforilációját fokozza, így gátolva a MP holoenzimet; ezzel a MP szubsztrátjának, a MLC20 fokozott foszforilációját eredményezve. Ekképpen a sejtek citoszkeletális tulajdonságait módosítva, a migrációt kontroll körülmények esetén protein-protein interakcióval az SMTNL1 gátolja. Gesztációs diabetes körülmények esetén az SMTNL1 génexpressziós szinten szabályozza a MYPT1 expresszióját, ráadásul közvetetten annak gátló foszforilációját emelve, csökkenti az epitél sejtek migrációs képességét.Tétel Szabadon hozzáférhető Magnesium-dependent-protein phosphatase 1B regulates the protein arginine methyltransferase 5 through th modulation of myosin phosphatase(2025) Keller, Ilka; Ungvári, Ádám; Major, Evelin; Horváth, Dániel; Kónya, Zoltán; Tóth, Emese; Erdődi, Ferenc; Kiss, Andrea; Lontay, BeátaTétel Szabadon hozzáférhető Mechanisms by which smoothelin-like protein 1 reverses insulin resistance in myotubules and mice(2022) Tamás, István; Major, Evelin; Horváth, Dániel; Keller, Ilka; Ungvári, Ádám; Haystead, Timothy A. J.; MacDonald, Justin A.; Lontay, BeátaTétel Szabadon hozzáférhető Smoothelin-like protein 1 promotes insulin sensitivity and modulates the contractile properties of endometrial epithelial cells with insulin resistance(2024) Keller, Ilka; Ungvári, Ádám; Kinter, Richárd; Szalmás, Alexandra Fanni; Kókai, Endre; Lontay, BeátaTétel Szabadon hozzáférhető Smoothelin-like protein 1 regulates development and metabolic transformation of skeletal muscle in hyperthyroidism(2021) Major, Evelin; Győry, Ferenc; Horváth, Dániel; Keller, Ilka; Tamás, István; Uray, Karen; Fülöp, Péter; Lontay, BeátaTétel Szabadon hozzáférhető Smoothelin-like Protein 1 Regulates the Thyroid Hormone-Induced Homeostasis and Remodeling of C2C12 Cells via the Modulation of Myosin Phosphatase(2021) Major, Evelin; Keller, Ilka; Horváth, Dániel; Tamás, István; Erdődi, Ferenc; Lontay, BeátaTétel Korlátozottan hozzáférhető A smoothelin-szerű 1 fehérje szerepének vizsgálata az endometriális sztromális sejtek decidualizációjábanFarkas, Emese Vivien; Lontay, Beáta; Keller, Ilka; DE--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai IntézetA humán endometriális sztromális sejtek (HESC) decidualizációja a női reprodukcióhoz szükséges differenciációs folyamat. A decidualizáció folyamata, komplexitása miatt, több ponton sérülhet, melynek következményeként klinikai betegségek széles spektruma jelentkezhet, mint pl.: rekurrens vetélés, koraszülés, infertilitás. Munkánk során HESC sejteket inzulin és nemi hormok jelenlétében in vitro decidualizáltattunk 6 napon keresztül. A differenciáció mértékét decidualizációs markerek vizsgálatával bizonyítottuk. Eredményeink szerint az SMTNL1 elősegíti a HESC decidualizációját és transzkripciós kofaktorként az endometrium hormonszenzitív elemeinek génexpresszióját is szabályozza.Tétel Korlátozottan hozzáférhető The role of smoothelin-like protein 1 in the physiological and pathological functions of the human endometrial stromal cellsSameh, Habiba; Lontay, Beáta; Keller, Ilka; Általános Orvostudományi Kar::Orvosi Vegytani Intézet; DE--Általános Orvostudományi Kar; Mótyán; Általános Orvostudományi KarThe role of SMTNL-1 affecting female reproductive ability, along with a regulating effect on the insulin-dependent glucose metabolism. Since infertility disorders are often paired with glucose homeostasis diseases, and it is a severe case affecting an ever-increasing number of fertile age women, we aimed to investigate SMTNL-1’s effect in in vitro human endometrial cell (HESC) model by supplementing the media of the applied cell culture model with a biologically effective peptide representing a sequence of the SMTNL-1 protein. We investigated the peptide’s effect in control and gestational diabetes environment, establishing in vitro differentiation model.