Béta-amiláz működésének vizsgálata maltooligomer szubsztrátokon
| dc.contributor.advisor | Gyémánt, Gyöngyi | |
| dc.contributor.author | Szabó, Erzsébet Katalin | |
| dc.contributor.department | DE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Kémiai Intézet | hu_HU |
| dc.date.accessioned | 2012-12-10T09:20:54Z | |
| dc.date.available | 2012-12-10T09:20:54Z | |
| dc.date.created | 2012-12-10 | |
| dc.date.issued | 2012-12-10T09:20:54Z | |
| dc.description.abstract | Diplomamunkám keretében az édesburgonyából származó β-amiláz enzim működését vizsgáltam maltooligomer szubsztrát sorozaton. Kísérleteink elvégzéséhez első lépésben kemoenzimatikus úton előállítottuk a kiindulási szubsztrát-sorozatot. Tanulmányoztuk a kromofor csoporttal jelölt maltooligomer szubsztrátok teljes hidrolízisét, melyhez HPLC-módszerrel detektáltuk a felszabaduló termékeket. Ezután Scientist® program segítségével modelleztük az enzim lehetséges bontási mechanizmusait. Megállapítottuk, hogy a legjobb illeszkedést a kísérletes adatok és a program által számolt értékek közt akkor tapasztaltuk, ha egymást követő lépések mellett processzív hasítást is figyelembe vettünk. A CNP-G5, CNP-G6, CNP-G7 és CNP-G8 szubsztrátok esetében így bontási mechanizmust javasoltunk. A hexamer szubsztrát hidrolízisekor különbséget tapasztaltunk, ugyanis az illeszkedés csak megfordítható reakció feltételezésével bizonyult megfelelőnek. Megvizsgáltuk az enzim katalitikus hatékonyságát is különböző lánchosszúságú szubsztrátokon. A meghatározásához kis szubsztrátkoncentrációk mellett mértük a hidrolízis reakciók kezdeti sebességét. A szubsztrátok tagszámának függvényében ábrázoltuk a katalitikus hatékonyság ln értékeit, mely alapján elmondható, hogy 8-as, 10-es tagszámig nő a hatékonyság. Ezután már elér egy maximális értéket, amely körül kis szórással ingadozik. Ez utalhat arra, hogy az enzim aktív centrumában 8-9 kötőhely található. A teljes hidrolízis vizsgálatok során tapasztaltuk, hogy a reakció legelején a termékek mennyisége gyorsan megnőtt, majd újra lecsökkent. Ezt a jelenséget magyarázhatja, ha az enzim hidroláz aktivitás mellett transzferáz aktivitással is rendelkezik. Így a kezdeti gyors, hidrolitikus lépések után képes a felszaporodott maltózt visszaépíteni a rövidebb láncokra. A folyamat pontosabb megismerésére további vizsgálatok szükségesek. | hu_HU |
| dc.description.corrector | gj | |
| dc.description.course | Vegyész Msc | hu_HU |
| dc.description.degree | Msc | hu_HU |
| dc.format.extent | 44 | hu_HU |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/2437/154801 | |
| dc.language.iso | hu | hu_HU |
| dc.subject | béta-amiláz | hu_HU |
| dc.subject | bontási mechanizmus | hu_HU |
| dc.subject.dspace | DEENK Témalista::Kémia | hu_HU |
| dc.title | Béta-amiláz működésének vizsgálata maltooligomer szubsztrátokon | hu_HU |