Emlődaganat sejtvonal genomjának módosítása CRISPR-Cas9 technológiával

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorBálint, Bálint László
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézethu_HU
dc.contributor.authorSzűcs, Máté
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentKoczok, Katalin
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Laboratóriumi Medicina Intézethu_HU
dc.date.accessioned2022-01-21T10:52:05Z
dc.date.available2022-01-21T10:52:05Z
dc.date.created2021
dc.description.abstractAz emlődaganat a daganatos megbetegedések között vezető halálok mind a mai napig világszerte. Elengedhetetlen a betegséghez kapcsolódó sejtek, illetve gének behatóbb ismerete a megfelelő kezelés beállítása vagy esetleges új terápia kidolgozása érdekében. Számos molekuláris biológiai módszer áll rendelkezésre, azonban egy, még nem teljesen optimalizált génszerkesztő rendszer lehet a kulcsa a gének pontosabb és részletesebb ismeretének. A CRISPR-Cas9 rendszer egy alapvetően prokariótákban található védekezési mechanizmus behatoló idegen nukleinsavakkal szemben. A nukleáz, illetve a hozzá tartozó RNS szakasz különböző transzfektálási módszerekkel azonban in vitro eukarióta sejtekbe juttatható. A vizsgálni kívánt génszakaszra specifikus RNS megtervezhető, így a gén kivágása után vizsgálható többek között annak élettani szerepe, a javító mechanizmusok által létrehozott mutációk, illetve létrehozhatóak knockout modellek. A rendszer sejtbe való juttatásának számos lehetősége van. A leggyakrabban használt virális infekció és lipofekció hatékony megoldást kínál kiegészítve azzal, hogy ismert génekre specifikus sgRNS-el akár kittekben is megvásárolhatóak. Azonban egy általunk tervezett, az adatbázisban nem található RNS szekvencia transzfektálására olcsóbb és gyorsabb megoldást kínál az elektroporáció. Kísérletem célja egy, a Cas9 nukleázt már alapvetően tartalmazó MCF-7 sejtvonal elektroporálási körülményeinek optimalizálása volt. A transzfektálás beállítása mCherry vörös fluoreszcens fehérjével történt. Ezt követően a sejtciklusban fontos szerepet játszó CDK4 gén kivágását végeztem el. Az elektroporálás és az azt követő vizsgálatok bíztató eredményeket hoztak, így az optimalizálási protokollt egyéb, a sejtvonalra specifikus génekkel érdemes tovább vizsgálni.hu_HU
dc.description.courseklinikai laboratóriumi kutató mesterképzéshu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.degreeMSc/MAhu_HU
dc.format.extent35hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/328088
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectEmlődaganathu_HU
dc.subjectCRISPR-Cas9hu_HU
dc.subjectMCF-7hu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudományhu_HU
dc.titleEmlődaganat sejtvonal genomjának módosítása CRISPR-Cas9 technológiávalhu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)