Miozin foszfatáz regulátor alegység nukleocitoplazmatikus transzportjának mechanizmusa

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorKiss, Andrea
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Természettudományi és Technológiai Kar::Kémiai Intézethu_HU
dc.contributor.authorGál, Viktória Ágnes
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentJeney, Viktória
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Molekuláris Medicina Kutató Központhu_HU
dc.date.accessioned2019-01-15T14:12:09Z
dc.date.available2019-01-15T14:12:09Z
dc.date.created2017
dc.description.abstractA protein foszfatáz-1 katalitikus alegységből és a miozinhoz is kötődő regulátor alegységből (MYPT1) felépülő miozin foszfatáz holoenzim (MP) a kezdeti feltételezésekkel szemben nem csak a foszfo-miozin, hanem más citoszkeletális, sőt sejtmagi fehérjék defoszforilációját is katalizálja. A MP holoenzimet a MYPT1 regulátor alegység irányítja a szubsztrátmolekulát tartalmazó kompartmenthez, azonban a MYPT1 szubcelluláris eloszlását és sejtmagi transzportját irányító mechanizmusok részletesen nem ismertek. Irodalmi adatok arra utalnak, hogy a MYPT1 nukleocitoplazmatikus transzportja n foszforiláció által szabályozódig. Ezen mechanizmus tanulmányozása céljából olyan modellrendszert kívánunk létrehozni, amelyben a MYPT1 fehérjét illetve annak Nterminális fragmentumát overexpresszáljuk, és a foszfatázgátló CLA kezelés hatására bekövetkező transzlokációt, valamint az azt kísérő foszforilációs változásokat ezen expresszált fehérje segítségével vizsgáljuk. Diplomamunkám célkitűzése az volt, hogy overexpresszáljuk a teljes hosszúságú Flag-MYPT1, valamint a rövidített MYPT11-296-Flag és MYPT11-296-eGFP fehérjéket, és összehasonlítsuk a lokalizációjukat és PP1cδ-val való kölcsönhatásukat kezeletlen és CLAkezelt sejtekben. Eredményeink szerint a Flag-MYPT1 főképp a tsA201 sejtek sejtmagjában lokalizálódik, és a sejtmagon belül pontszerű régiókban koncentrálódik. A MYPT11-296-eGFP is főképp a sejtmagban detektálható, ahol homogén festődést mutat. Immunprecipitációs kísérleteink alapján PP1cδ kimutatható mind a Flag-MYPT1, mind a MYPT11-296-Flag immunkomplexében, és a CLA kezelés nem befolyásolja a katalitikus alegységgel való kölcsönhatást. Sejtfrakciók Western blot analízise alapján a CLA kezelés kismértékben befolyásolja a MYPT11-296-Flag megoszlását a citoszol és sejtmagi frakciók között.hu_HU
dc.description.courseklinikai laboratóriumi kutató mesterképzéshu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.degreeMSc/MAhu_HU
dc.format.extent32hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/263022
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectMiozin foszfatázhu_HU
dc.subjectProtein-foszfatáz 1hu_HU
dc.subjectMYPT1hu_HU
dc.subjectImmunfluoreszcenciahu_HU
dc.subjectImmunprecipitációhu_HU
dc.subjectPP1c delta izoformahu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományokhu_HU
dc.titleMiozin foszfatáz regulátor alegység nukleocitoplazmatikus transzportjának mechanizmusahu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)