A poli-ADP-riboziláció szerepének vizsgálata SaOS sejtek differenciálódásának szabályozásában
dc.contributor.advisor | Erdélyi, Katalin | |
dc.contributor.advisordept | Debreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar | hu_HU |
dc.contributor.advisordept | Orvosi Vegytani Intézet | hu_HU |
dc.contributor.author | Kiss, Katalin | |
dc.contributor.department | DE--Általános Orvostudományi Kar | hu_HU |
dc.contributor.opponent | Sarang, Zsolt | |
dc.contributor.opponentdept | Debreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar | hu_HU |
dc.contributor.opponentdept | Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézet | hu_HU |
dc.date.accessioned | 2016-06-14T14:06:47Z | |
dc.date.available | 2016-06-14T14:06:47Z | |
dc.date.created | 2012 | |
dc.description.abstract | Az oszteoszarkóma a leggyakoribb primer csontdaganat, amelyre jellemző a tumor sejtek direkt csontszövet-, illetve osteoid termelése. Vizsgálatainkat SaOS-2 sejtvonalon végeztük, mely egy oszteoszarkóma eredetű osteoblast epitél sejtvonal.A SaOS-2 sejtek részletesen jellemzettek, magas osztódási rátával bírnak, alkalikus foszfatáz aktivitásuk révén megfelelő médium jelenlétében képesek kalcium depozícióra, íly módon megfelelő modellrendszernek tekinthetők a csont differenciálódás vizsgálatára.A poli-ADP-riboziláció egy reverzibilis poszttranszlációs módosítás. A poli(ADP-ribóz) polimeráz-1 (PARP-1) aktiválódását követően szubsztrátját, a NAD+-ot nikotinamidra és ADP-ribózra hasítja, melyet fehérjék glutamát és aszpartát oldalláncácához kapcsolva hosszú, elágazó polimert szintetizál. A poli(ADP-ribóz) polimerek életideje nagyon rövid, lebontásukért a poli(ADP-ribóz) glikohidroláz (PARG) felel. A poli-ADP-ribozilációnak kitüntetett szerepe van a genomi integritás fenntartásában, DNS hibajavításban, a sejthalál és egyes transzkripciós folyamatok szabályozásában. Vizsgálatainkban arra kerestünk választ vajon ez a dinamikus fehérjemódosítási folyamat szerepet játszik-e a csontdifferenciálódás szabályozásában. Korábban, a PARP-1 és PARG fehérjék stabil géncsendesítését lentivírus részecskékkel valósítottuk meg. A csendesítés hatékonyságát, mRNS szinten, kvantitív PCR-al is vizsgáltuk. Megfelelő antitest hiányában a fehérjék deplécióját funkció-kiesési vizsgálattal elemeztük immuncitokémiával és Western blot technikával. Hidrogén-peroxiddal kezelt sejtekben jelentős poli(ADP-ribóz) polimer képződést tapasztaltunk. A polimerek lebontása jelentős mértékben elhúzódott a PARG hiányos SaOS-2 sejtekben.A csontdifferenciálódási folyamatot 12 napon keresztül követtük nyomon aszkorbinsav-2-foszfáttal, D-vitaminnal és dexametazonnal kiegészített médium jelenlétében. A differenciálódás során vizsgáltuk az alkalikus foszfatáz aktivitásának változását valamint a kalcium depozíciót kvalitatív, Alizarin Red festési eljárással és kvantitatív kalcium kolorimetriás mérőmódszer segítségével. | hu_HU |
dc.description.course | általános orvostudományi | hu_HU |
dc.description.courseact | nappali | hu_HU |
dc.description.courselang | magyar | hu_HU |
dc.description.coursespec | Biokémia-genomika | hu_HU |
dc.description.degree | MSc/MA | hu_HU |
dc.format.extent | 31 | hu_HU |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/2437/228636 | |
dc.language.iso | hu | hu_HU |
dc.subject | poli-ADP-riboziláció | hu_HU |
dc.subject | poszt-transzlációs fehérjemódosítás | hu_HU |
dc.subject | oszteoszarkóma | hu_HU |
dc.subject.dspace | DEENK Témalista::Orvostudomány | hu_HU |
dc.title | A poli-ADP-riboziláció szerepének vizsgálata SaOS sejtek differenciálódásának szabályozásában | hu_HU |