Kísérletek a transzglikozilezés enzimatikus megvalósítására

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorGyémánt, Gyöngyi
dc.contributor.authorGyarmati, Zoltán
dc.contributor.departmentDE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Kémiai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2010-12-09T10:09:32Z
dc.date.available2010-12-09T10:09:32Z
dc.date.created2010-12-09
dc.date.issued2010-12-09T10:09:32Z
dc.description.abstractA szénhidrátok és glikokonjugátumok fontos élettani szereppel bíró biomolekulák. Az oligoszacharidok kémiai szintézise bonyolult feladat, megfelelő védőcsoportok alkalmazását, sztereospecifikus glikozilezési módszerek használatát igényli. Az enzimes szintézisnek számos előnye van, enyhe reakciókörülményeket igényel, regio- és sztereoszelektív védőcsoportok használata nélkül is. A BSMA egy termostabil maltogén α-amiláz hidrolitikus és transzferáz aktívitással is rendelkezik. A BSMA a keményítő α(1-4) glikozidos kötéseit hidrolizálja, maltóz egységet hasítva. Az enzim széles körű akceptor specifitással rendelkezik, a donor szegmenst képes átvinni mono, diszacharidokra és más vegyületekre. A BSMA megtalálható a Brenda adatbázisban, pH optimuma 6, és optimális működési hőmérséklete 20 és 80 oC között van. A BSMA aktivitás mérésére a 2-klór-4-nitrofenil-galaktopiranozil-α-D-maltozid és metilumbelliferil-α-D-maltozid szubsztrátokat használtuk. A szubsztrátok kiválasztása a BSMA alhely térképe alapján történt, amely 2 glikon és 2 aglikon kötőhelyből áll. Igazoltuk, hogy az enzim kizárólag a kromofort vagy fluorofort szabadítja fel a szubsztrátokból. A CNP csoport felszabadulását 400 nm hullámhosszon spektrofotométerrel detektáltuk, még a felszabaduló MUB fluoreszcenciáját 355 nm elnyelési és 460 nm kibocsátási hullámhosszon vizsgáltuk. Mindkét szubsztrát alkalmas a BSMA aktivitás mérésére. A KM és Vmax értékeinek a számításához nem lineáris illesztést és Lineweaver-Burk -féle ábrázolást használtunk.hu_HU
dc.description.correctorgj
dc.description.coursevegyészhu_HU
dc.description.degreerégi képzéshu_HU
dc.format.extent36hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/101109
dc.language.isohuhu_HU
dc.language.isoenhu_HU
dc.subjectBSMAhu_HU
dc.subjectakceptorhu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Kémiahu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Kémia::Biokémiahu_HU
dc.titleKísérletek a transzglikozilezés enzimatikus megvalósításárahu_HU
dc.title.translatedAttempts transglycosilic to achive enzymeshu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Természettudományi és Technológiai Kar)