A KCa3.1 ioncsatorna szerepe a CAR-T sejtek effektor funkciójában

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorHajdu , Péter Béla
dc.contributor.advisorJusztus , Vivien
dc.contributor.authorHorváth , Péter
dc.contributor.departmentDE--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai Intézet
dc.date.accessioned2025-07-04T09:59:26Z
dc.date.available2025-07-04T09:59:26Z
dc.date.created2025-05-06
dc.description.abstractA T-sejtek a limfociták igen nagy csoportját alkotják, melyek fontos szerepet játszanak az aktív immunitás kialakításában. Ezen sejtek legismertebb képviselői a CD4+ T-sejtek (helper/segítő T-sejtek) és CD8+ T-sejtek (citotoxikus/ölő T-sejtek). A T-sejtek csak fehérje alapú, receptorokhoz kötött antigéneket képesek felismerni. Ez az MHC/HLA I és II receptorok segítségével történik, melyhez hozzákötődnek a TCR-ek (T-sejt receptorok) és komplexet alkotva ismeri fel az adott antigént. Az antigén felismerés következtében elindul egy sejten belüli Ca2+-függő jelátvitel, melynek következtében a T-sejt aktiválódik; proliferálódik; citokin, interleukin 2 (IL2) és további citotoxikus molekula, mint például granzim B expresszálódik. A T-sejtek kálium ioncsatornái, mint amilyen a Ca2+-függő KCa3.1 kritikus szerepet játszik T- sejtek jelátvitelének és működésének szabályozásában azáltal, hogy biztosítják a hajtóerőt a megfelelő Ca2+ -függő jelátvitelhez. A genetikailag módosított T-sejtek az úgynevezett CAR-T sejtek, kiméra antigén receptorokkal (CAR) rendelkeznek. Ezeket a sejteket daganatellenes terápiáknál használják, hiszen az új, módosított receptorainak köszönhetően képes a tumorsejtek felszínén található specifikus antigént detektálni, hozzákapcsolódni és elpusztítani a tumorsejtet. A munkám során a Ca2+-aktivált, KCa3.1 kálium csatorna CAR-T sejtek effektor funkciójában betöltött szerepét tanulmányoztam. Retrovirális transzdukció segítségével sGFP konjugált, harmadik generációs, CD19-specifikus CAR-t és mCherry (monomer piros fluoreszcens fehérje) konjugált KCa3.1 ioncsatornát expresszáltattunk KCa3.1-deficiens Jurkat limfocita sejtvonalban, majd a transzdukció hatékonyságát áramlási citométerrel határoztuk meg. Direkt immunofluoreszcens jelölést végeztünk a CD19 sejtfelszíni marker expressziójának validálása céljából. Végezetül Live-or-Dye alapú killing-assay-t végeztünk TRAM34, KCa3.1 ioncsatorna gátlószer jelenlétében, amely segítségével meghatározhattuk a KCa3.1 ioncsatornák szerepét a CAR-T sejtek antitumorális válaszában. Sikeresen igazoltunk, hogy az általunk létrehozott mCherry-KCa3.1+ Jurkat CAR sejtek specifikusan felismerték és eliminálták célsejteket. Továbbá a KCa3.1 ioncsatorna gátlása szignifikánsan növelte az általunk létrehozott sejtek specifikus ölési hatékonyságát.
dc.description.courseBiológia BSc
dc.description.degreeBSc/BA
dc.format.extent30 oldal
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/395422
dc.language.isohu
dc.rights.infoHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.
dc.subjectIoncsatorna, CAR-T sejtek, KCa3.1, immunterápia
dc.subject.dspaceBiológiai tudományok
dc.titleA KCa3.1 ioncsatorna szerepe a CAR-T sejtek effektor funkciójában
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
Horvath_Peter_Szakdolgozat_2025.pdf
Méret:
1.17 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Szakdolgozat
Megjelenítés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
2.35 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Biológiai és Ökológiai Intézet)