Atomerő Mikroszkópos vizsgálatok endothel sejteken

dc.contributor.advisorJenei, Attila
dc.contributor.advisorPálinkás, József
dc.contributor.authorNagy, János Péter
dc.contributor.departmentDE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Fizikai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2009-12-16T08:33:30Z
dc.date.available2009-12-16T08:33:30Z
dc.date.created2009-12
dc.date.issued2009-12-16T08:33:30Z
dc.description.abstractMunkám során az endothel sejtek VEGF kezelés hatására történő fenesztrálódásának részletgazdag megjelenítése és számszerű kiértékelése, valamint a fenesztrálódási mechanizmus leírása és az idő függvényében való lefolyásának vizsgálata volt a cél. Ennek megvalósítására két atomerő-mikroszkópos (AFM) mérési eljárást alkalmaztam; a „contact” és „tapping” módú eljárásokat. Különböző geometriai ill., anyagi összetételből származó, mechanikai tulajdonságú mérőtűket használtam a részletesség igényének figyelembe vételével. A kiértékelést és a megfigyelt objektumok méretének statisztikai analízisét számítógépes kiértékelő programok (SXMImage, SPIP) segítségével végeztem. Kísérleteinkben primer, humán köldökzsinór véna endothel (HUVEC) tenyészetből származó sejtek 15 percig 24 illetve 48 óráig 100 ng/ml VEGF-fel lettek kezelve, majd fixálva. A p38 MAP kináz aktiválódását atomerő mikroszkóppal vizsgáltam. Kimutattam, hogy a VEGF kezelés fokozza az endothel sejt permeabilitását, citoszkeleton átrendeződést, továbbá a p38 MAP kináz korai aktivációját idézi elő, valamint a sejt-sejt kontaktusok fellazulását eredményezi. Atomerő mikroszkópiás vizsgálattal a fenesztráció előfordulásának változását sikerült kimutatnom 15 perc és a 24 ill. 48 órás VEGF kezelést követően. A p38 MAP kinázt gátló SB203580 előkezelés ugyanakkor megakadályozta a VEGF indukálta permeabilitás növekedést és megelőzte a sejt-sejt kapcsolatok szétnyílását. Fenesztrátumoknak tekintettem azokat a sejtfelszíni nyílásokat, amelyek átmérője 50 és 300 nm közé esett és a nyílás mélysége elérte vagy meghaladta a 100 nm-t. A fenesztrálódott endothel felszínről nagy felbontású, 4×4 és 8x8µm ill. a fenesztrátumok részletes tanulmányozása céljából 2x2 és 1×1m nagyságú, képeket készítettem. Eredményeim alapján a VEGF a p38 kináz aktivációján és az azt követő citoszkeleton átrendeződésen keresztül szabályozza az endotheliális permeabilitást. A p38 kináz VEGF kezelésre történő aktivációját az inhibítor SB203580 előkezelés fenesztráció gátló hatásával igazoltam.hu_HU
dc.description.courseFizikushu_HU
dc.description.degreerégi képzéshu_HU
dc.format.extent31hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/90887
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectAtomerőhu_HU
dc.subjectMikroszkóphu_HU
dc.subjectEndothelhu_HU
dc.subjectSejthu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Műszaki tudományokhu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományokhu_HU
dc.titleAtomerő Mikroszkópos vizsgálatok endothel sejtekenhu_HU
dc.title.translatedAtomic-force Microscope examinations on endothel cells.hu_HU
Fájlok