Az IL-2 receptor intracelluláris ligandkötésének vizsgálata

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorVolkó, Julianna
dc.contributor.advisordeptÁltalános Orvostudományi Kar::Biofizikai és Sejtbiológiai Intézet
dc.contributor.authorBozsó, Boglárka
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Kar
dc.date.accessioned2024-08-15T06:44:53Z
dc.date.available2024-08-15T06:44:53Z
dc.date.created2024-08-13
dc.description.abstractAz interleukin-2 (IL-2) az immunrendszer szabályozásában központi szerepet betöltő, a T-sejtes immunitásban nélkülözhetetlen citokin. A limfocita proliferáció és differenciáció serkentésén túl az aktiváció-indukált sejthalál folyamatában is kulcsfontosságú. Három alegységből felépülő receptorkomplexében a β- és γc-láncok a jelátviteli funkciókért, az α-alegység a ligand nagy affinitású, specifikus kötéséért felelős. A receptorláncok monomerek, dimerek vagy nagy affinitású trimerek formájában jelenhetnek meg a sejtfelszínen. Intézetünkben korábban kimutatták, hogy a három alegység a ligand kötődése nélkül is egymás molekuláris közelségében található T sejtek felszínén. Munkacsoportunk a receptorkomplex sejten belüli összeszerelődését vizsgálva felfedezett egy új intrakrin mechanizmust, amely magyarázatot adhat az antiproliferatív (anti-IL-2Rα) citokin terápiák limitált hatékonyságára különböző neopláziákban (pl. felnőttkori T-sejtes leukémia/limfóma) vagy autoimmun betegségekben (pl. szklerózis multiplex). Munkánk célja az intracelluláris ligandkötődés kimutatása volt, FLIM-FRET módszer segítségével. A modellrendszerként használt HeLa-γc sejtvonalat (mely az IL-2R γc-láncát stabilan expresszálja), tranziensen ko-transzfektáltuk EGFP-vel jelölt citokinnel, mCherry-vel jelölt IL-2Rα-val és BFP-vel jelölt Golgi- vagy membránmarkerrel. Negatív kontrollként EGFP-IL-2Rα-mCherry konstruktot használtunk, melyet klónozással állítottunk elő. A donor fluoreszcencia élettartamát Picoquant egyedi fotonszámláló egységgel felszerelt Nikon A1 konfokális mikroszkóppal mértük. A kapott görbéket SymphoTime 64 szofter segítségével analizáltuk, ahol a számításba csak a Golgi- vagy a membránmarker alapján manuálisan kijelölt ROI-hoz tartozó pixeleket vontuk be. Energiatranszfert mértünk nemcsak a sejtmembránban, de a Golgi-ban is, ami az IL-2Rα és a citokin intracelluláris kölcsönhatására utal. Az IL-2 receptor sejten belüli működése (magát a receptort és annak ligandját is kifejező sejteket célzó) antiproliferatív terápiákban az intracelluláris célpontokra hívja fel a figyelmet (Jak kináz inhibítorok) a sejtfelszíni receptorok gátlásával szemben, így eredményünk klinikai jelentőséggel bírhat.
dc.description.courseáltalános orvos
dc.description.courseactnappali
dc.description.courselangmagyar
dc.description.coursespecImmunológia, sejt- és mikrobiológia
dc.description.degreeegységes, osztatlan
dc.format.extent32
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/379012
dc.language.isohu
dc.rights.accessHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.
dc.subjectintracelluláris ligandkötődés
dc.subjectinterleukin-2
dc.subjectintrakrin jelátvitel
dc.subjectFRET
dc.subjectFLIM-FRET
dc.subject.dspaceOrvostudomány
dc.subject.dspaceBiológiai tudományok
dc.titleAz IL-2 receptor intracelluláris ligandkötésének vizsgálata
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
Diplomamunka_Bozso_Boglarka_20240429_jav_fin.pdf
Méret:
1.64 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Megjelenítés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
2.35 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)