A CXCL1 kemokin klónozása, expressziója és karakterizálása

dc.contributor.advisorUray, Iván
dc.contributor.advisorLengyel, Máté
dc.contributor.advisordeptÁltalános Orvostudományi Kar::Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézet
dc.contributor.authorJäger, Petra Krisztina
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Kar
dc.date.accessioned2024-06-01T09:22:26Z
dc.date.available2024-06-01T09:22:26Z
dc.date.created2024
dc.description.abstractA CXC motívum kemokin ligand 1 (CXCL1), a CXC kemokin alcsaládhoz tartozó citokin, amely részt vesz számos gyulladásos folyamat kialakulásában és egyes tumorok progressziójában. Első célunk az volt, hogy megvizsgáljuk két anti-inflammatórikus, rákmegelőző tulajdonságokkal bíró szer, a bexarotene (Bex) és a carvedilol (Carv) hatását a CXCL1 kemokin expresszióját makrofágokban és tumor sejtekben. A CXCL1 génexpresszióját qPCR módszerrel vizsgáltuk kezeletlen, valamint LPS-sel aktivált THP-1 humán monocyta sejtekben. A THP-1 sejtek felülúszójával HCC1143 tripla negatív emlőrák sejteket kezeltünk, és az ily módon kezelt emlőtumor sejtekből is elvégeztük a qPCR mérést. A CXCL1 hatásának sejtszintű, in vitro vizsgálata céljából génexpressziós vektorba való klónozását tűztük ki célul. Első lépésként specifikus reverse primerrel készítettünk cDNS-t, majd azt klónozó primerekkel amplifikáltuk. Az előállított inzertet pJET1.2 klónozó vektorba ligáltuk, kompetens DH5α baktériumokba transzformáltuk, majd ampicillin szelekció után izoláltunk klónokat. A klónok szelekciója restrikciós enzimekkel, a klónozó primerekkel, majd az inzert szekvenciáján belül tapadó primerpárral futtatott PCR reakcióval történt. A klónozott gént kapilláris szekvenálással validáltuk. Végül az azonosított inzertet mCherry és EGFP expressziós vektorokba helyeztük át. További célkitűzésünk a CXCL1 erőltetett kifejezése az expressziós vektor segítségével, majd a fehérje parakrin és autokrin hatásainak vizsgálata nem transzformált, illetve malignus emlő epithél sejtekre.
dc.description.courseorvosi diagnosztikai analitikus
dc.description.courseactnappali
dc.description.courselangmagyar
dc.description.coursespecOrvosi kutatólaboratóriumi analitika
dc.description.degreeBSc/BA
dc.format.extent31
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/370741
dc.language.isohu
dc.rights.accessHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.
dc.subjectkemokin
dc.subjectCXCL1
dc.subjectklónozás
dc.subject.dspaceOrvostudomány
dc.titleA CXCL1 kemokin klónozása, expressziója és karakterizálása
dc.title.translatedThe cloning, expression and characterization of CXCL1 chemokine
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
Jager_Petra_Szakdolgozat.pdf
Méret:
1.77 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Szakdolgozat
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
2.35 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás: