Protein foszfatáz Z regulátor fehérjék vizsgálata Candida albicans-ban

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorDombrádi, Viktor Béla
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.advisordeptOrvosi Vegytani Intézethu_HU
dc.contributor.authorSzundi, Csilla
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentMajoros, László
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentdeptOrvosi Mikrobiológiai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2016-06-20T10:29:27Z
dc.date.available2016-06-20T10:29:27Z
dc.date.created2016
dc.description.abstractA protein foszfatáz Z a szerin/treonin protein foszfatáz enzimcsaládba tartozó gomba specifikus protein foszfatáz, amit az opportunista patogén Candida albicans-ban a CaPPZ1 gén kódol. A gén terméke a CaPpz1 fehérje szerepet játszik a stressz válasz és a gombafonalak (hífa) növekedésének szabályozásában, ezért orvosbiológiai jelentőséggel bír. Munkám célja a foszfatáz regulációjának felderítése. Irodalmi adatok alapján ismeretes volt, hogy Saccharomyces cerevisiae-ben a ScHal3 és ScVhs3 fehérjék gátolják a foszfatáz Z aktivitását. Ezek a gátló fehérjék a hasonló szerkezetű ScCab3 fehérjével együtt részt vesznek a Coenzim A bioszintézisében is. Szekvencia hasonlóság alapján C. albicans-ban két nagyon hasonló fehérjét találtunk amelyeket CaHal3 és CaCab3 névvel láttunk el. Munkám során fehérje-fehérje interakciós vizsgálatokat végeztem a CaPpz1 és a lehetséges gátló fehérjék közötti kölcsönhatások kimutatására. A glutation-Sepharose 4B gyantához GST-cimkével ellátott rekombináns CaHal3 és CaCab3 fehérjéket kötöttem, majd a gyantát His-cimkével rendelkező CaPpz1 fehérjével inkubáltam. A foszfatáz kikötődését mosás és elúció után Western blot módszerrel detektáltam. Eredményeim szerint mind a CaHal3, mind a CaCab3 képes a CaPPZ1-hez kötődni. Ezzel összhangban a laboratórium munkatársai enzim aktivitás mérésekkel igazolták, hogy a CaHal3 és CaCab3 is képes gátolni a CaPpz1 foszfatáz aktivitását. A fehérje kölcsönhatások fiziológiás szerepét hal3 deléciós mutáns S. cerevisiae törzsben tanulmányoztam. Megvizsgáltam, hogy a CaHal3 és CaCab3 fehérjék expressziója hogyan befolyásolja a mutáns törzs életképességét só (LiCl) és sejtfal károsító anyag (Hygromicin B) által kiváltott stressz körülmények között. Azt tapasztaltam, hogy a várakozással ellentétben a CaCab3 fehérje komplementálta az ScHal3 hiányát, míg a szerkezetileg jobban hasonló CaHal3 fehérjének nem volt hatása. Konklúzióként elmondható, hogy bár az in vitro mérések szerint a C. albicans CaHal3 és CaCab3 fehérje egyaránt képesek a CaPpz1 foszfatázhoz kötődni in vivo körülmények között csak a CaCab3 bizonyult hatékonynak. Tehát az általunk megvizsgált két gombafajban a foszfatáz Z regulációját valószínűleg más fehérjék valósítják meg.hu_HU
dc.description.coursemolekuláris biológiahu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.coursespecBiokémia-genomikahu_HU
dc.description.degreeMSc/MAhu_HU
dc.format.extent42hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/228768
dc.language.isohuhu_HU
dc.rightsNevezd meg! - Ne add el! - Ne változtasd! 2.5 Magyarország*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/hu/*
dc.subjectCandida albicanshu_HU
dc.subjectProtein foszfatázhu_HU
dc.subjectHal3hu_HU
dc.subjectCab3hu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudományhu_HU
dc.titleProtein foszfatáz Z regulátor fehérjék vizsgálata Candida albicans-banhu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)