Molekuláris Orvostudomány Doktori Iskola
Állandó link (URI) ehhez a gyűjteményhez
Általános Orvostudományi Kar
Molekuláris Orvostudomány Doktori Iskola
(vezető: Dr. Csernoch László)
Orvostudományi doktori tanács
D42
tudományág:
-elméleti orvostudományok
Doktori programok:
- Jelátviteli folyamatok sejt- és molekuláris biológiája
(programvezető: Dr. Virág László) - Membránbiofizikai kérdések és vizsgálómódszerek
(programvezető: Dr. Szöllősi János) - Élettan és neurobiológia
(programvezető: Dr. Csernoch László)
Böngészés
Molekuláris Orvostudomány Doktori Iskola Szerző szerinti böngészés "Aradi, János"
Megjelenítve 1 - 3 (Összesen 3)
Találat egy oldalon
Rendezési lehetőségek
Tétel Szabadon hozzáférhető Egy új, HIV replikációt gátló oligonukleotid szintézise, kémiai és biológiai jellemzéseHorváth, András; Aradi, János; DE -- Orvos- és Egészségtudományi Centrum -- Általános Orvostudományi Kar -- Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézet; Elméleti orvostudományok doktori iskolaMunkacsoportunk biológiailag aktív oligonukleotidok tanulmányozása és fejlesztése során egy potens anti-HIV aktivitással rendelkező oligonukleotidot állított elő, melyet Suligovirnak neveztünk el, kémiai szerkezete: (s4dU)35. Doktori disszertációmban az (s4dU)35 kémiai szintézisének optimalizálása, kémiai, biokémiai karakterizálása, valamint anti-HIV aktivitásának tanulmányozása során végzett munkámat mutatom be. 1. Kidolgoztunk két módszert a Suligovir előállítására: A módszer: előállítottuk a 4-tio-dezoxiuridin foszforamidit és CPG származékát és ezek felhasználásával a Suligovirt automata oligonukleotid szintetizálóban B módszer: előállítottuk (dC)35-ből folyékony H2S kezeléssel a Suligovirt 2. 1H-, 13C-, 31P-NMR spektroszkópiás és tömegspektrometriás módszerekkel meghatároztuk a két módon előállított Suligovir kémiai szerkezetét. Megállapítottuk, hogy a Suligovir A nem teljesen tiolált (31-32 kénatomot tartalmaz), míg a Suligovir B tiolása gyakorlatilag teljes (35 kénatomot tartalmaz molekulánként). 3. A két módszerrel előállított Suligovir biológiai aktivitásában nem találtunk lényeges eltérést. Megállapítottuk, hogy szerkezeti inhomogenitása és magas előállítási költsége miatt az A módszerrel nem célszerű nagyobb mennyiségben előállítani a Suligovirt, de kísérleti rendszerekben a Suligovir B-vel azonos biológiai aktivitása miatt fel lehet használni. 4. Kimutattuk, hogy a Suligovir nukleázokkal szemben a kiindulási, módosítatlan (dC)35 oligonukleotidhoz képest negyvenszer stabilabb és a celluláris toxicitása nagyon alacsony. 5. A Suligovir a CD4+ sejtekhez tízszer nagyobb mértékben kötődött, mint a CD4- sejtekhez. 6. CLSM vizsgálataink szerint a Suligovir a sejt belsejébe nem jut be, hanem a sejt felszínén a koleszterin gazdag lipid „raft”-okban elhelyezkedő CD4 molekulákhoz kötődik. A sejtfelszínen jelentősen kolokalizál a tioredoxinnal is és vele kovalens kölcsönhatást is kialakíthat. Összefoglalva: a Suligovir egy ígéretes terápiás ágens a HIV fertőzés vagy az AIDS kezelésére, egy a vírus bejutását gátló inhibitor. A folyamatban lévő in vivo kísérletek döntik majd el, hogy a Suligovir csupán egy elméleti szempontból érdekes molekula vagy további fejlesztés után esetleg gyógyszerként jelenhet meg egy súlyos, halálos kimenetelű betegség, az AIDS kezelésében.Tétel Szabadon hozzáférhető Pharmacological regulation of telomerase, induction of telomerase dependent cell death using chimeric oligonucleotides or all-trans-retinoic-acid/arsenic-trioxide combination treatmentTárkányi, Ilona; Aradi, János; Segal-Bendirdjian, Evelyne; DE -- Orvos- és Egészségtudományi Centrum -- Általános Orvostudományi Kar -- Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézet; Elméleti orvostudományok doktori iskolaImmortalization is an indispensable step in oncogenesis. Most of the human malignant cells attain their immortality through stabilization of their telomere length by reactivating telomerase enzyme, a specialized reverse transcriptase. I presented in my thesis two promising approaches to target telomerase in immortal human cell lines using combinational strategies. We designed an oligonucleotide family, composed of a 13mer antisense sequence against the hTR template part and a 3' or 5' (s4dU)n moiety, possibly interacting with the catalytic protein subunit of human telomerase (hTERT), and characterized the in vitro inhibition parameters of the members. The potent and specific derivate (s4dU)8AS(PS), selected for cell culture studies could enter human cells, and caused, after a long-term treatment, death of the entire treated immortal cell population. We proved that all-trans-retinoic acid (ATRA) and arsenic trioxide (As2O3) cooperate to downregulate hTERT expression in both retinoid sensitive and resistant cell lines. hTERT repression results in a decrease of telomerase activity and leads to telomere shortening and subsequent cell death. This synergistic effect of ATRA and As2O3 could not be exclusively explained by chromatin modifications and the mechanisms of hTERT repression remain to be elucidated. Nevertheless, our findings provide direct evidence that telomerase targeting can represent a likely new mechanism by which ATRA/As2O3 therapy can exert its action in acute promyelocytic leukemia patients.Tétel Szabadon hozzáférhető The role of parallel signaling pathways in maintaining lymphoid cell survivalNagy, Zsuzsanna; Kirken, Robert A; Aradi, János; DE -- Orvos- és Egészségtudományi Centrum -- Általános Orvostudományi Kar -- Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézet; University of Texas -- Houston Medical School -- Department of Integrative Biology and Pharmacology; Elméleti orvostudományok doktori iskolaT lymphocytes are critical for a functional immune system. However, their uncontrolled activation and growth can be manifested as a number of lymphoid derived diseases such as autoimmunity, allograft rejection, and lymphoma. Therefore, understanding the role of key signaling molecules and the ability to modify their activity in mature cells may provide new therapeutic strategies to treat T cell mediated disorders. The purpose of this study was to dissect the role of key signaling pathways activated by interleukin-2 (IL2) and other T cell growth factors that share the IL2 receptor gamma chain (γc) (IL2, 4, 7, 9, 13, 15, 21) in mediating T cell growth and survival. To accomplish this objective, antisense oligonucleotides targeted against signaling molecules including γc, Raf isoforms, Stat3, traditional pharmaceuticals to disrupt Janus tyrosine kinase 3, PI3K (wortmannin), mTor (rapamycin) and MEK kinase (PD98059) activity were utilized and their effects characterized in lymphoid cells. Antisense oligonucleotide targeted against γc inhibited protein expression (40%) in a lymphoid tumor cell line inducing apoptotic death and cell cycle arrest in G2-M phase, as measured by FACS analysis of Annexin V and Propidium Iodide stained cells. Inhibition of Jak3 (PNU156804) showed similar effects and disrupted Stat5 and MAPK activation. Novel evidence is shown here that IL2 can activate multiple isoforms of Raf, and inhibition of these isoforms by antisense oligonucleotides failed to affect cell survival or Stat5 activation. Similar results were found for inhibition of PI3K, mTor and MEK kinases. Lastly, we show that Stat3 antisense oligonucleotide treatment of a human tumor cell line bearing constitutively activated Stat3 induces cell death (40%, measured with TUNEL assay) but that IL2 can rescue these cells possibly mediated via Stat5 that becomes hyperactivated in Stat3 deleted cells. Evidence is provided that suggests Bcl2 plays key role in this cell survival process. We conclude from our findings that the Mapk, Stat and PI3K pathways likely function as separate entities in lymphoid cells, suggesting that evolutionarily these pathways might have evolved to perform specialized cell functions that may be redundant for other T cell activities. Moreover, our results suggest that Stat molecules are critical to the survival and growth of T cells and represent a therapeutically relevant target to combat T cell derived disorders.