Hallgatói dolgozatok (Fogorvostudományi Kar)

Állandó link (URI) ehhez a gyűjteményhez

https://hdl.handle.net/2437/164846

Böngészés

Hallgatói dolgozatok (Fogorvostudományi Kar) Szerző szerinti böngészés "Általános Orvostudományi Kar::Élettani Intézet"

Megjelenítve 1 - 2 (Összesen 2)
  • Nincs kép
    TételKorlátozottan hozzáférhető
    Odontoblast-szerű sejtek mechanosensitiv tulajdonságainak vizsgálata in vitro
    Boda, Zsolt Dénes; Bohács, Judit; Racskó, Márk; Fogorvostudományi Kar::Konzerváló Fogászati nem önálló Tanszék; Általános Orvostudományi Kar::Élettani Intézet; DE--OEC--Fogorvostudományi Kar; Marincsák , Rita; Kunka, Árpád József; Fogorvostudományi Kar::Konzerváló Fogászati nem önálló Tanszék; Fogorvostudományi Kar::Dentoalveoláris Sebészeti nem önálló Tanszék
    Bevezetés: A mai napig nem teljesen tisztázott a fogfájdalom pontos pathofiziológiai mechanizmusa. Több hipotézis is létezik, melyek közül az úgynevezett hidrodinamikai elmélet, mely szerint a fogakat kívülről érő fizikai ingereket a dentintubulusokban létrejövő folyadékáramlás érzékelése által veszik fel az odontoblast sejtek, majd transzmitterek felszabadítása által közvetítik az idegvégződések felé. Célkitűzés: Vizsgálataink során arra voltunk kíváncsiak, hogy az odontoblast-szerű sejteken jelenlévő mechanoszenzitív ioncsatornák közül melyik milyen mértékben járul hozzá ténylegesen a fizikai ingerek érzékeléséhez. Anyagok és módszerek: Korábban izolált és odontoblast irányba differenciáltatott pulpális sejtek mechanikai stimulációjára hipoozmotikus oldatot (200 mosM) alkalmaztunk, az egyes csatornák funkcionalitását pedig specifikus gátlószerek segítségével vizsgáltuk. A sejtek intracelluláris Ca2+ szintjét fluoreszcens Fura-2 festék segítségével Flexstation 3 microplate reader készülék használatával mértük. Eredmények: A Piezo1, TRPA1, TRPV2, és TRPV4 csatornák specifikus gátlószerei mind képesek voltak szignifikánsan csökkenteni a hipoozmotikus oldat által kiváltott Ca2+ influxot. A negatív kontrollként használt TRPM8 gátlószernek ezzel ellentétben nem volt hatása, mely eredményből kutatócsoportunk korábbi génexpressziós kísérleti eredményeivel összhangban arra lehet következtetni, hogy ez a receptor nem vesz részt a humán pulpális sejtek mechanosensoros működéseiben. Következtetés: Eredményeink alapján elmondható, hogy a differenciáltatott odontoblast-szerű sejteken kifejeződő számos mechanoreceptor külön-külön is fontos jelátviteli szerepet tölthet be a fogakat érő ingerek érzékelésében. Ezáltal a fogakban kifejeződő TRP és Piezo csatornák gátlószerei jelentős terápiás potenciállal bírhatnak a közeljövő fogorvoslásában. Köszönetnyilvánítás: Munkánkat a FK_20 134725 OTKA és az ÚNKP-23-3-II-DE-430 pályázatok keretein belül végeztük.
  • Nincs kép
    TételKorlátozottan hozzáférhető
    Szenzoros TRP csatornák kifejeződése odontoblast-szerű sejteken
    Mészáros, Attila; Bohács, Judit; Racskó, Márk; Fogorvostudományi Kar::Konzerváló Fogászati nem önálló Tanszék; Általános Orvostudományi Kar::Élettani Intézet; DE--OEC--Fogorvostudományi Kar; Marincsák, Rita; Kunka, Árpád József; Fogorvostudományi Kar::Konzerváló Fogászati nem önálló Tanszék; Fogorvostudományi Kar::Dentoalveoláris Sebészeti nem önálló Tanszék
    Bevezetés: A szenzoros neuronok mellett a fog pulpa sejtjei, különösen az odontoblastokat, komoly szereppel bírnak a fogat érő fiziológiás és pathológiás ingerek érzékelésében és továbbításában. Az elmúlt évtizedben számos különböző Tranziens Receptor Potenciál (TRP) és Piezo ioncsatorna expresszióját írták le ezen sejtekről különböző modellekben, elsősorban patkányokon és egereken. Az emberi fogak esetében azonban még nem teljesen tisztázott, hogy ezek közül melyek vesznek részt a fizikai és kémiai ingerek érzékelésében. Célkitűzés: Célunk az volt, hogy humán pulpából izolált primer sejtpopulációból (dental pulp cells – DPC) odontoblast-szerű sejteket differenciáltassunk, melyek felhasználásával további kísérleteink során arra kerestük a választ, milyen sensoros ioncsatornák fejeződnek ki ezeken a sejteken, különös tekintettel a TRP család tagjaira. Anyagok és módszerek: Sebészileg eltávolított bölcsességfogak pulpájából sejteket izoláltunk (DPC), majd ezeket odontoblast irányba differenciáltattuk in vitro három héten keresztül. A differenciációt az odontoblastok által termelt extracelluláris mátrixot kimutató Alizarin Red festéssel igazoltuk. Az ioncsatornák expresszióját mRNS szinten qPCR módszerrel mutattuk ki. A jelenlévő ioncsatornák funkcionalitását farmakológiai módszerrel specifikus agonisták használatával igazoltuk, Flexstation 3 microplate reader készülék és Fura-2 kalcium festék segítségével. Eredmények: A DPC-k izolálását és a sejtek odontoblaszt irányú differenciáltatását egyaránt sikeresen végeztük. Alizarin Red festés során erőteljesebb színreakciót és szignifikánsan magasabb abszorbancia értéket tapasztaltunk a differenciáltatott populáció esetén az azonos ideig kontroll körülmények között tenyésztett sejtekhez képest. qPCR módszerrel sikerült kimutatnunk a TPRA1, TRPV1, TRPV2, és TRV4 ioncsatornák jelenlétét odontoblast-szerű sejteken. Továbbá a TRPA1-re, TRPV2-re, és TRPV4-re specifikus agonisták segítségével megmutattuk, hogy ezek a csatornák ténylegesen funkcióképesek ezeken a sejteken. Következtetés: Eredményeinkből arra lehet következtetni, hogy az emberi fogpulpa sejtjein számos funkcionális termoszenzitív és mechanikai ingerekre is érzékeny ioncsatorna van jelen, melyek további vizsgálata új terápiás lehetőségeket rejt magában. Köszönetnyilvánítás: Munkánkat az NKFI (OTKA) FK_20 134725 és az ÚNKP-23-3-II-DE-430 pályázatok támogatták.